詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)
英文名稱:Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK
產品規格:20μl
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK 產品規格:20μl 濃度:5mM in DMSO 分子式:C21H28FN3O7 分子量:453.5 含量:77~97%(TLC) 純度:≥92%(HPLC) 儲存:-20℃,有效期6個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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球孢毛霉核糖體合成蛋白BOP1抗體Human FOXD4L6 ELISA Kit豚鼠內皮1(ET-1)免疫試劑盒
類芽胞桿菌調節中心體分離早期相關激BORA抗體Human FOXE3 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
腐霉萊姆病螺旋體抗體Human FOXG1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬成熟相關蛋白BOULE抗體Human FOXH1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
側耳伸長因子結合蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌特異性堿性蛋白Y2抗體Human FOXO4 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
: 馴Yu資源名稱: 瓊氏不動桿菌 質量規格:>98%,BRαN已酰基葡糖苷試劑盒氫化原阿片堿
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質量規格:>98%,BRαL巖藻糖苷試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格:>98%,BRαL艾杜糖苷試劑盒10-羥基攀援山橙堿
Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)秦氏蜜環 L-亮氨酰甘氨酸阿立新AElisa
草生毛霉 茶樹油癌胚抗原Elisa
芽孢桿屬 2-氨基-3-吡氨酰磷酸合成IElisa
龍舌蘭盤孢 3-羥基氨基脲敏感性氧化Elisa
鏈孢囊 2-羥基-5-硝基煙酸白蛋白Elisa
黑曲霉 2-溴-2′-乙酮白蛋白Elisa
玫瑰暗黃鏈霉 4--7-甲氧基喹啉白介-18結合蛋白Elisa
地中海中慢生根瘤* 乙酰酮鎂白介1αElisa
扣囊復膜孢酵母 1,3-二乙烯基-1,1,3,3-四甲基二硅氧烷鉑(0)白介2受體Elisa
鼠李糖乳桿 2-溴甲基-6-白念珠烯化Elisa
紅城紅球 聚氧化乙烯白三烯B4Elisa
根瘤 聚氧化乙烯白三烯B5Elisa
熱帶假絲酵母 聚氧化乙烯白三烯C4Elisa
大腸埃希氏定量質控株* 聚氧化乙烯白三烯D4Elisa
群結腐霉 聚氧化乙烯白介1Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)