詳細介紹
商品介紹:
Temsirolimus是一種mTOR抑制劑,IC50值為1.76μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:162635-04-3 別名:Torisel;CCI-779 純度:98.88% 分子量:1030.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Temsirolimus
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌屬免疫球蛋白超家族成員10抗體Human RIMKLB ELISA KitBeta Agonists(β-)免疫試劑盒
芽胞桿菌大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體Human LRP11(Low-density lipoprotein receptor-related protein 11) ELISA Kit19-Nortestosterone(19-去甲睪)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種干擾α受體抗體Human RIMS4 ELISA Kit左右不對稱發育因子2(LEFTY2)
焦曲霉磷化干擾α受體抗體Human RIN3 ELISA Kit組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)
玫瑰皮黃鏈霉菌磷化胰島受體β抗體Human RINT1 ELISA Kit組織因子途徑抑制物(TFPI)
樟疫霉核因子κB抑制蛋白E抗體Human RING1 ELISA Kit組織因子(TF)
貝萊斯芽胞桿菌磷化整合β4抗體Human ribosomal protein L4 ELISA Kit組織型纖溶原激活劑(t-PA)
大腸埃希氏菌磷化整合β4抗體Human RIC8A ELISA Kit組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)
嗜腳動物咸海鮮球菌IQCD蛋白抗體Human DDT(D-Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit組織相容性2-K1-K區(H2-K1)
硝鹽還原嗜鹽堿桿菌IQCC蛋白抗體Human RGS5 ELISA Kit組織多肽特異性抗原(TPS)
棲土曲霉IQCA1蛋白抗體Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) ELISA Kit組織多肽抗原(TPA)
矩圓黑盤孢集成復雜蛋白亞單位3抗體Human RGS9 ELISA Kit組織蛋白去乙酰化(HD)
孤島海桿狀菌干擾alpha 14蛋白抗體Human RGSL1 ELISA Kit組織蛋白抗體(Cath Ab)
嗜松籃狀菌白介6抗體Human RHBDD1 ELISA Kit組織蛋白S(CTSS)
環狀芽胞桿菌白介-10抗體Human RHBDL2 ELISA Kit組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)
植物乳桿菌植物亞種白介6抗體Human RHCG ELISA Kit組織蛋白K(cath-K)
AS2.590資源名稱: 平滑假絲酵母 質量規格:>98.0%(T)蘆薈苷
赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum 質量規格:>98.0%(GC)苦玄參苷IB
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>97.0%(GC)苦玄參苷IA
mTOR抑制劑(Temsirolimus)短小芽胞桿 4-二甲基氨基熱休克蛋白27Elisa
Lonsdalea quercina subsp. quercina N-乙酰-3,5-二-L-酪氨酸熱休克蛋白-70Elisa
地衣芽孢桿 3,5-二甲氧基苯熱休克蛋白90Elisa
條紋炭角 磺吡乳清蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2,5-二甲氧基苯乳酸Elisa
發酵乳桿 異脲酸三烯酯乳酸脫氫Elisa
圓芝6號 2-甲基氨-5-二苯甲酮乳鐵蛋白Elisa
施氏假單胞 碳酸二苯酯狀腺原氨酸Elisa
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 二芐酮生長Elisa
大腸埃希氏 乙酯視黃結合蛋白Elisa
馬腺疫鏈球獸疫亞種 烯硫視黃結合蛋白4Elisa
杉葉散斑殼 甲基烯酸環己酯瘦Elisa
弓形蟲(GJS-2株) 苯基化鎂酸性磷酸Elisa
根瘤 環己羧甲基賴氨酸Elisa
三葉草根瘤 馬來酸二烯酯鎖鏈Elisa