公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:醛糖還原酶抑制劑(Ranirestat)
英文名稱:Ranirestat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ranirestat(AS-3201)是醛糖還原酶抑制劑,糖尿病性shen經(jīng)病變臨床3期。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):147254-64-6 別名:AS-3201 純度:99.14% 分子式:C??H??BrFN?O? 分子量:420.19 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
板栗蛇孢日規(guī)殼LRRC59蛋白抗體Human PELI1 ELISA Kit拓樸異構(gòu)Ⅱ(TopoⅡ)ELISA Kit
苜蓿中華根瘤菌LRRC41蛋白抗體Human CYP11A1(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, mitochondrial) ELISA Kit脫氧皮質(zhì)(DOC)ELISA Kit
日本根霉促黃體生成受體抗體Human PELI2 ELISA Kit脫氧尿三磷(DUTP)ELISA Kit
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)乳清蛋白α抗體Human PFKFB2 ELISA Kit脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA Kit
球孢白僵菌核纖層蛋白B2抗體Human PES1 ELISA Kit脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA Kit
金黃色葡萄球菌金黃亞種層粘蛋白α5抗體Human HCRTR1(Orexin receptor type 1) ELISA Kit脫氧吡啶啉(DPD)ELISA Kit
白僵菌L-瓜抗體Human PEX1 ELISA Kit脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA Kit
紅曲霉泌乳升高蛋白1抗體Human CYP11A1(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, mitochondrial) ELISA Kit脫氫表雄硫酯(DHEA-S)ELISA Kit
大腸埃希菌溶體相關(guān)膜蛋白4α抗體Human PEX11G ELISA Kit脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISA Kit
亞細(xì)亞菌屬分化相關(guān)基因14抗體Human PDS5B ELISA Kit脫氫表雄(DHEA)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌β內(nèi)酰樣蛋白2抗體Human HCRTR1(Orexin receptor type 1) ELISA Kit脫-γ-羧基凝血原(DCP)ELISA Kit
杏鮑菇神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體Human PDXDC1 ELISA Kit褪黑(MT)ELISA Kit
膠孢可溶性半乳糖凝集3結(jié)合蛋白抗體Human PDSS2 ELISA Kit突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)ELISA Kit
非無(wú)菌藥品 金黃色葡萄球菌(陽(yáng)性)瘦抗體Human PDE6C ELISA Kit突觸泡蛋白(SYP)ELISA Kit
Flavobacterium磷脂磷酯LPIN1抗體Human PDZD2(PDZ domain-containing protein 2) ELISA Kit突觸回蛋白2(SYNJ2)ELISA Kit
微紅微球菌G蛋白偶聯(lián)受體6抗體Human PDE7B(cAMP-specific 3′,5’-cyclic phosphodiesterase 7B) ELISA Kit透明質(zhì)(HAase)ELISA Kit
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)紫丁香酚苷(五加苷B)
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格: >99.0 %(GC)五加皂苷B
沙門(mén)氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)人參三
醛糖還原酶抑制劑(Ranirestat)Collagen X Ⅹ型膠原抗體酮肟 98%
Contactin-6 NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體丁酮肟 99%
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體環(huán)己酮肟 97%
Claudin 3 緊密連接蛋白3抗體羥酰 98%
Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體羥-O-磺 97%
Cortactin 皮層肌動(dòng)蛋白抗體肟 98%
phospho-Cortactin (Tyr466) 化皮層肌動(dòng)蛋白抗體硝釓,六水 AR,99%
Claudin 5 緊密連接蛋白5抗體硝釓,六水 99.99% metals basis