詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Porcupine抑制劑(LGK974)
英文名稱:LGK974
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:LGK974 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg LGK974是一種有效的特異性的Porcupine(PORCN)抑制劑,也有效抑制Wnt信號通路,IC50為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1243244-14-5 純度:98.97% 分子量:396.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
灰黃青霉DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體Human MSC(Musculin) ELISA Kit人B受體相關蛋白31(BCAP31)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human CENPU (Centromere protein U) ELISA KIT人B生長因子(BCGF)免疫試劑盒
釀酒酵母上皮粘附分子抗體Human MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) ELISA KIT人B淋巴瘤因子6(Bcl6)免疫試劑盒
香菇屬酪蛋白激受體B2抗體Human MOAP1 (Modulator of apoptosis 1) ELISA KIT人B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
少孢酵母表皮生長因子抗體Human MAZ (Myc-associated zinc finger protein) ELISA KIT人B連接蛋白(BLNK)免疫試劑盒
*雞油菌都不能訂購表皮生長因子受體3抗體Human MOB2 (MOB kinase activator 2) ELISA KIT人B活化因子受體(BAFF-R)免疫試劑盒
突臍蠕孢菌酪蛋白激A4受體抗體Human MDGA1 (MAM domain-containing glycosylphosphatidylinositol anchor protein 1) ELISA KIT人B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
雀黃鏈霉菌上皮鈣粘附分子抗體Human MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) ELISA KIT人Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒
鏈格孢紅生成受體抗體Human PRX(Periaxin) ELISA Kit人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母腦啡肽抗體Human MKX(Homeobox protein Mohawk) ELISA Kit人B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒
楊齒白木層孔菌EID2蛋白抗體Human MARCO (Macrophage receptor MARCO) ELISA KIT人B淋巴抗原(CD20)免疫試劑盒
大腸桿菌上皮粘附分子抗體Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit人blca-4 免疫試劑盒
淡紫擬青霉紅膜相關蛋白ERMAP抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人blca-1 免疫試劑盒
菜豆間座殼腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體Human SEMG1(Semenogelin-1) ELISA Kit人Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)免疫試劑盒
擬粉紅鎖擲孢酵母腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體Human MAD1L1(Mitotic arrest deficient 1-like protein 1) ELISA Kit人B7-H4 免疫試劑盒
斯氏梭菌硫軟骨蛋白多糖3抗體Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)免疫試劑盒
綠色木霉Trichoderma│viride 質量規格:100μg/ml,u=3%華蟾酥基
熒光假單胞菌生物型FPseudomonas│fluorescens biotype F 質量規格:分析標準品木蘭脂
多噬伯克霍爾德氏菌Burkholderia│multivorans 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)異飛薊賓
Porcupine抑制劑(LGK974)土芽孢乳桿 2,4-二氟苯過氧化Elisa
pnz8149 3,5-二氟苯過氧化氫Elisa
構巢曲霉 5-煙酸環磷酸腺苷Elisa
油菜核病 (+)-兒茶 水合物黃體生成Elisa
慢弧 1,2--d4激活AElisa
根瘤 2-苯基乙基異硫代酸酯卵泡抑Elisa
香菇19 三乙基氫化鋰球蛋白AElisa
釀酒酵母 (S)-(+)-3-甲基-2-丁球蛋白GElisa
厚垣孢普可尼亞 2,5-二嘧啶球蛋白MElisa
淺藍灰曲霉 2--5-甲氧基嘧啶同型半胱氨酸Elisa
熱帶假絲酵母 4-溴-2-羥基苯甲褪黑Elisa
黑青霉 (S)-3,3-二甲基-2-丁褪黑受體1AElisa
華根霉 1-溴-3-(三氟甲氧基)苯褪黑受體1BElisa
根瘤 2-溴-6-氟褪黑受體1CElisa
茄腐鐮刀 4-(2-噻唑基偶氮)間苯二酚維生DElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)