SIK2抑制劑(YKL-05-099)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-IKK beta /FITC 熒光素標(biāo)記核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
依諾肝鈉英文名稱： Tin (II) oxalate蛋白酪磷H1抗體包裝25g

依曲替酯;阿維酯英文名稱： Tin (IV) oxide磷化磷脂酰肌激催化亞單位D抗體包裝5g

依曲韋林英文名稱： Titanium (III) sulfate磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體包裝1g

依替膦鈉英文名稱： Titanium (IV) sulfate穿孔抗體包裝250mg

*度英文名稱： Tributyl citratePALM3抗體包裝100g

*英文名稱： Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution芳香酯1(對(duì)氧磷)抗體包裝25g

乙嘧啶英文名稱： Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas磷吡哆氧化抗體包裝100g

乙昔羅鈉英文名稱： Tryptamine磷化蛋白激C抗體包裝25g

異丁司特英文名稱： Tungsten (VI) oxide磷化蛋白激C抗體包裝500g

吲達(dá)帕英文名稱： Tungsten carbide-200磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體包裝1g

吲哚美辛英文名稱： Tungsten powder磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體包裝250mg

右旋蘭索拉唑英文名稱： Tungstic (VI) acid磷化磷脂酰肌激抗體包裝100g

右旋洛芬英文名稱： Verruculogen from Penicillium verruculosum磷化磷脂酰肌激抗體包裝25g

右旋洛芬丁三英文名稱： Wool fat磷化蛋白激C抗體包裝5g

右佐匹克英文名稱： X-GLUC, sodium salt磷化蛋白激C抗體包裝25g

熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白3試劑盒黃芪苷（黃芪皂苷IV）-對(duì)照品;有報(bào)告

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白12試劑盒雷公藤（雷公藤內(nèi)酯）-對(duì)照品;有報(bào)

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白10試劑盒野百合堿(豬屎豆堿)-對(duì)照品;有報(bào)告
SIK2抑制劑(YKL-05-099)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體α-糖 CHLORALOSE, a-(RG)Human, Mouse, Rat

核凋亡因子THAP1抗體殼聚糖 CHITOSAN(RG)Human, Mouse

顆粒相關(guān)蛋白TIA-1抗體殼 CHITIN(RG)Human, Mouse

胸腺核蛋白1抗體殼 CHITIN(RG)Human, Mouse

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體CHETOMIN(RG)Human, Mouse, Rat

辣椒受體3抗體CHETOMIN(RG)Human, Mouse, Rat

TEX261蛋白抗體鵝去氧膽 CHENODEOXYCHOLIC ACID(RG)Human, Mouse, Rat

促狀腺受體抗體鵝去氧膽 CHENODEOXYCHOLIC ACID(RG)Human, Mouse

磷化酪激A抗體2-吡 CHLOROPYRAZINE, 2-(AS)Human, Mouse