詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:MK-5108
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
MK-5108是高效和特異性的Aurora-A激酶抑制劑,IC50值為0.064nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1010085-13-8 別名:VX-689 純度:98.0% 分子量:461.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
侵蝕侏儒囊菌環指蛋白94抗體Anti-IL15RA Antibody糖基化依賴性黏附分子(GlyCAM1)
釀酒酵母血栓調節蛋白抗體Anti-IL16 Antibody糖基化磷脂酰肌特異性磷脂D1(GPLD1)
地衣芽孢桿菌腺泡狀軟組織肉瘤結構域蛋白ASPC抗體Anti-IL17A Antibody糖磺基轉移9(CHST9)
枯草芽孢桿菌G蛋白偶聯誘導蛋白2受體抗體Anti-IL16 Antibody(PB0250)糖磺基轉移8(CHST8)
蜂房類芽孢桿菌腫瘤壞死因子C/淋巴β抗體Anti-IL17A Antibody糖磺基轉移7(CHST7)
紅法夫酵母甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體Anti-IL17B Antibody糖磺基轉移6(CHST6)
Citricoccus轉化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體Anti-IL17B Antibody糖磺基轉移5(CHST5)
根瘤菌屬腫瘤相關抗原L6抗體Anti-IL17C Antibody糖磺基轉移4(CHST4)
沙針擬盤多毛孢跨膜蛋白59抗體Anti-IL17C Antibody糖磺基轉移3(CHST3)
傘菌假單胞菌神經元蛋白22抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉移2(CHST2)
釀酒酵母味覺受體蛋白家族2亞基60抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉移15(CHST15)
枯草芽孢桿菌枯草亞種骨架結合蛋白2抗體Anti-IL17F Antibody糖磺基轉移14(CHST14)
炭黑曲霉TUB蛋白抗體Anti-IL17RA Antibody糖磺基轉移13(CHST13)
馬爾他布魯氏菌轉錄因子Tbx5抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉移12(CHST12)
大腸埃希氏桿菌跨膜蛋白9家族成員4抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉移11(CHST11)
傘形卷霉共濟失調毛細血管擴張癥D相關蛋白抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉移10(CHST10)
小谷酰胺三角四肽重復區蛋白α抗體嗜熱乳鏈球菌小鼠前列腺上皮細胞
SUGT1蛋白抗體蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)小鼠膀胱成纖維細胞
紡錘體和著絲粒相關蛋白3抗體鰻弧菌成年小鼠心肌細胞
紡錘體和著絲粒相關蛋白2抗體溫和氣單胞菌小鼠直腸上皮細胞
Aurora-A激酶抑制劑(MK-5108)平臍蠕孢 鋁、鉍、鈷、鎂、釩/Al, Bi, Co, Mg, V酮體Elisa
鞘氨單胞 2-氨基-4-苯硫酚凝血因子VElisa
鋁、鉍、鈷、鎂、釩/Al, Bi, Co, Mg, V半胱氨酸蛋白-8Elisa
豌豆根瘤 2-溴-4-氟苯CD83Elisa
類銀白紫絲膜 2-溴噻吩干擾調節因子7Elisa
竹針孢座囊 2,5-吡啶二羧酸干擾-λ3Elisa
鈍齒棒桿 鋁、銅、鐵、錳、鋅/Al, Cu, Fe, Mn, Zn谷氨酸Elisa
Hymenobacter mucosus 鋁、鈹、鉻、銻、錫/Al, Be, Cr, Sb, Sn受體酪氨酸激AXLElisa
肉色栓 二化鉑維生D25羥化Elisa
大腸埃希 銀、汞、鉬、鈉、硒/Ag, Hg, Mo, Na, Se色P450家庭成員27A1Elisa
星形擬盤多毛孢 (S)-3-吡咯烷色P45027B1Elisa
米曲霉 鈰、鈷、鋰、鈧、、釔 /Ce, Co, Li, Sc, Tl, Y色P4502J2Elisa
金產色鏈霉 N-乙酰乙二1,25-二羥維生D(3)24-羥化,線粒體Elisa
根瘤 鈷、鍺、銦、鋰、、釔 /Co, Ge, In, Li, Tl, Y偽狂犬病GB抗原Elisa
淡紫擬青霉 鈰、鈷、鋰、鈧、、釔/Ce, Co, Li, Sc, Tl, Y偽狂犬病GE抗原Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)