詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AN3199 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
AN3199是一種PDE4抑制劑,IC50為94.5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1187187-10-5 純度:98.0% 分子量:327.14 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
大腸埃希菌DDX58抗體Human TCF4(Transcription factor 4) ELISA Kit人補體因子H(CFH)免疫試劑盒
(鐮刀菌)DG4DDX4抗體Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA Kit人補體因子B前體(pre-CFB)免疫試劑盒
蟲草屬鴨瘟病DPV抗體Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT人補體片斷5b(C5b)免疫試劑盒
長雙歧桿菌交聯纖維蛋白二聚體抗體Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit人補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌腦發育調節蛋白抗體Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit人補體片斷4b(C4b)免疫試劑盒
豬丹絲菌DNA斷裂因子抗體(蛋白激活脫氧核糖核)Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA Kit人補體片斷3b(C3b)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌脫氧核糖核γ抗體Human MSRA(Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase) ELISA Kit人補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
香菇死亡相關轉錄因子1抗體Human COL4A3BP(Collagen type IV alpha-3-binding protein) ELISA Kit人補體片段4d(C4d)免疫試劑盒
紅栓菌脫氧核糖核1抗體Human TYRO3 (Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3) ELISA KIT人補體片段3d(C3d)免疫試劑盒
假黃色桿菌屬脫氧核糖核2抗體Human VMAC (Vimentin-type intermediate filament-associated coiled-coil protein) ELISA KIT人補體片段3c(C3c)免疫試劑盒
雜色曲霉死亡防衛蛋白1抗體Human TYRP1 (5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase) ELISA KIT人補體片段3b受體(C3bR)免疫試劑盒
盧森坦類諾卡氏菌Duffy血型趨化因子受體抗體Human FAM20B(Glycosaminoglycan xylosylkinase) ELISA Kit人補體蛋白9(C9)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌DEK癌基因結合蛋白Human BTN2A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1) ELISA Kit人補體蛋白5(C5)免疫試劑盒
釀酒酵母PSD95結合蛋白1抗體Human HMGB2(High mobility group protein B2) ELISA Kit人補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母PSD95結合蛋白2抗體Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) ELISA Kit人補體蛋白3(C3)免疫試劑盒
ChryseobacteriumPSD95結合蛋白4抗體Human MGP(Matrix Gla protein) ELISA Kit人補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)免疫試劑盒
: HBUM81033資源名稱: 鏈霉菌 質量規格:分析標準品,98.8%桔皮
: IFO12550ATCC12980BGSC9A20CCM2062BCRC(formerlyCCRC)11092CCUG26241CIP66.23DSM22IAM11062JCM2501KCTC1665KCTC1752LMG6939NCCB75019NCIMB8923(formerlyNCDO1768)NCTC10339NRRLB-1172VKMB-510資源名稱: 嗜熱脂肪地芽孢桿菌 質量規格:分析標準品塔拉薩敏
金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質量規格:大豆皂苷Bb
PDE4抑制劑(AN3199)D-半乳糖(標準品)英文名稱: TeniposideB和T衰減蛋白抗體包裝5g
D-(標準品)英文名稱: TeniposideCD4抗體包裝150
D-甘露糖(標準品)英文名稱: Tenofovir disoproxil fumarateCD44抗體包裝2050
D-核糖(標準品)英文名稱: Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate白共同抗原抗體包裝580
D-環絲(標準品)英文名稱: TenoxicamCD5抗體包裝5g
D-焦谷(標準品)英文名稱: Terbinafine 間粘附分子-1抗體包裝25g
D-木糖(標準品)英文名稱: Terbinafine 神經粘附分子1抗體包裝5g
D-絲(標準品)英文名稱: Terbinafine HClL選擇抗體包裝25g
Deoxycorticosterone acetate...英文名稱: Terbinafine HClCD68抗體包裝5g
Dexamethasone Acetate(標準品)英文名稱: Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6號染色體開放閱讀框226抗體包裝100g
Dexamethasone Sodium Phosph...英文名稱: Terlipressin Acetate間隙連接蛋白30抗體包裝25g
Dexamethasone(標準品)英文名稱: Thiamphenicol2號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
Diethylstilbestrol(標準品)英文名稱: Thiamphenicol3號染色體開放閱讀框18抗體包裝5g
DL-精(標準品)英文名稱: Thymopentin Acetate巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體包裝1g
Donepezil HCl type III(標準品)英文名稱: Tiagabine HCl外基質金屬蛋白誘導因子抗體包裝5g