詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PLX8394 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:PLX8394 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg PLX8394是一種有效的,選擇性的Raf抑制劑,能夠抑制BRAFV600E的活性,IC50值約為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1393466-87-9 純度:98.44% 分子量:542.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
淡天藍鏈霉菌FAM50C蛋白抗體Human DCPS (m7GpppX diphosphatase) ELISA KIT牛生長激釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒
異常畢赤酵母FAM91A1蛋白抗體Human CYP4F2 (Phylloquinone omega-hydroxylase CYP4F2) ELISA KIT牛生長激(GH)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌FRMD1蛋白抗體Human DCAF12L1 (DDB1- and CUL4-associated factor 12-like protein 1) ELISA KIT牛腎上腺髓質(ADM)免疫試劑盒
溶桿菌髓鞘缺陷相關蛋白抗體Human CMPK1 (UMP-CMP kinase) ELISA KIT牛腎上腺(EPI)免疫試劑盒
龜裂鏈霉菌叉頭蛋白B1+B2抗體Human DCST1 (DC-STAMP domain-containing protein 1) ELISA KIT牛神經型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒
孔曲霉叉頭蛋白G1抗體Human CYBRD1 (Cytochrome b reductase 1) ELISA KIT牛神經肽Y(NPY)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種腫瘤/抗原112抗體Human DDHD1 (Phospholipase DDHD1) ELISA KIT牛狀腺原(T3)免疫試劑盒
炭黑曲霉微管動力調節蛋白FAM82A抗體Human CCNYL1 (Cyclin-Y-like protein 1) ELISA KIT牛軟骨寡聚基質蛋白(COMP)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌FAM50B蛋白抗體Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)免疫試劑盒
弗氏檸檬菌形成2抗體(成蛋白)Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT牛乳脫氫(LDH)免疫試劑盒
解脂復膜孢酵母(亞羅解脂酵母)脂閥結構蛋白1抗體Human CDK16 (Cyclin-dependent kinase 16) ELISA KIT牛乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
鮑魚菇成纖維生長因子17抗體Human CAND1 (Cullin-associated NEDD8-dissociated protein 1) ELISA KIT牛肉堿棕櫚酰轉移-II(CPT-II)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉成纖維生長因子23抗體Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT牛肉堿棕櫚酰轉移-Ⅰ(CPT-Ⅰ)免疫試劑盒
豬丹絲菌成纖維生長因子20抗體Human CWF19L1 (CWF19-like protein 1) ELISA KIT牛肉堿免疫試劑盒
玉米大斑病菌成纖維生長因子19抗體Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT牛溶菌(LZM)免疫試劑盒
厚垣孢普可尼亞菌成纖維生長因子22抗體Human CLMP (CXADR-like membrane protein) ELISA KIT牛特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格:分析標準品,>99.5%(GC)煙
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)熊去氧膽
: GIMSCAU1.033資源名稱: 稻腸桿菌 質量規格:分析標準品,≥99.8%(GC)新補骨脂異黃
BRAFV600E抑制劑(PLX8394)金黃硬皮馬勃 L-氨酰-L-氨基酸睪酮Elisa
紫棕炭團 乙酸銨-d71,25-二羥基維生D3Elisa
塔賓曲霉 2-乙炔基吡啶13,14二氫15-酮前列腺F2αElisa
酸棒桿Ⅲ型 (±)-α-羥基-2,5寡腺苷酸合成2Elisa
草鏈霉 3-羥基甲酯8羥基脫氧鳥苷Elisa
詹氏酸桿 N-乙酰-D-氨酸Bcl-2相關X蛋白Elisa
深綠木霉 1H,1H,2H-全氟-1-己烯BH3結構域凋亡誘導蛋白Elisa
等鼠藥速測盒輔助設備 4--2-氟苯基乙酸B瘤-XLElisa
竹喙球 四丁基B瘤因子2Elisa
橙色農霉 四乙基CD3分子Elisa
大腸埃希 四甲基CD4分子Elisa
硬結節桿 春雷霉鹽酸鹽CD8分子Elisa
紅球 4-溴-2,5-二c-fosElisa
鼠李糖乳桿 3-甲基-5-苯并噻吩CXC趨化因子配體1Elisa
蠟狀芽孢桿 9-芐基咔唑CXC趨化因子配體2Elisa