詳細介紹
商品介紹:
MG-101是一種有效的半胱氨酸蛋白酶抑制劑,作用于鈣蛋白酶I,鈣蛋白酶II,組織蛋白酶B,和組織蛋白酶L,Ki值分別為190nM,220nM,150nM,500pM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:110044-82-1 別名:Calpain inhibitor I;ALL 純度:95.0% 分子量:383.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:半胱氨酸蛋白酶抑制劑(MG-101)
英文名稱:MG-101
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
解淀粉芽孢桿菌新型核蛋白質1抗體Human PDGF-BB(Plaet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit黃體生成釋放激(LHRH)
Sinibacillus核仁蛋白3抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit黃體生成(LH)
絲膜菌屬核孔蛋白1抗體Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit氧化(XOD)
黑附球菌NADPH氧化4抗體Human PRL(Prolactin) ELISA Kit環磷腺苷(cAMP)
暗孢節菱孢菌脂肪分化因子24Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit環磷酰(CTX)
豚鼠氣單胞菌肌動蛋白結合蛋白Z盤狀蛋白抗體Human PTX3(Pentraxin 3) ELISA Kit環磷腺苷(cAMP)
谷棒桿菌活化T核因子5蛋白抗體Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit環磷鳥苷(cGMP)
球形賴芽孢桿菌磷化活化T核因子5蛋白抗體Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit環加氧2(COX-2)
平滑假絲酵母脂質運載蛋白抗體Human MFGE8(Lactadherin) ELISA Kit環孢A(CsA)
波蘭青霉2型神經纖維瘤抗體Human NT-3(Neurotrophin-3) ELISA Kit踝蛋白(talin)
緩慢葡萄球菌膜相關磷脂轉運蛋白抗體Human NT-4(Neurotrophin-4) ELISA Kit花生四烯5脂氧合(ALOX5/LOG5)
釀酒酵母納曲抗體IgGHuman MMP13(Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit花生四烯5脂加氧(ALOX-5)
植物乳桿菌磷化分化相關基因NDRG1抗體Human MIA(Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit花生四烯15脂加氧(ALOX15/LOG15)
赤曲霉磷化分化相關基因NDRG1抗體Human MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit花生四烯(AA)
黑烏霉泛連接NEDD4-2抗體Human MMP-7(Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit琥珀酰合成(SCS)
煙色毛霉磷化2型神經纖維瘤抗體Human MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit紅原卟啉(EP)
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質量規格:>98%,BR楊梅
哈維弧菌Vibrio│harveyi 質量規格:>99%,BR蘆薈大黃
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質量規格:>98%,BR大黃酚
半胱氨酸蛋白酶抑制劑(MG-101)韋斯特迪克氏曲霉 RV肉湯雌二Elisa
腐爛粘束梗霉 瓊脂培養基N(溴化十六烷基三瓊脂)黃體生成Elisa
樟疫霉 溴化十六烷基三瓊脂孕酮Elisa
球孢白僵 檢定培養基1號(高PH)促卵泡Elisa
產氨短桿 D-阿洛糖雌二Elisa
弓形蟲(RH株) 支原體瓊脂培養基睪酮Elisa
新城疫病 麥康凱肉湯催乳Elisa
長柄條孢牛肝 BBL液體培養基乳糖Elisa
黑曲霉 GN增液顆粒糜蛋白Elisa
大腸埃希氏 1-甲酰胰蛋白Elisa
香菇 蛋白胨緩沖液顆粒酪蛋白αs1Elisa
木耳屬 MLCB寒天培地顆粒酪蛋白βElisa
丁香假單胞 瓊脂培養基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)κ酪蛋白Elisa
構巢曲霉 腸道富集肉湯培養基(USP)雌Elisa
靈芝屬 (S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二促腎上腺皮質Elisa