詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
2×250ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
注意事項: 有硫酸銅、乙醇等組成。如出現沉淀,可過濾后再使用。在制作保色浸制標本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴實,并避免陽光直射。 儲存條件:室溫,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
金針菇β晶體蛋白B1抗體Human GBP4 ELISA Kit小鼠G蛋白偶聯膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
粉紅單端孢磷化Bax抗體Human GDAP2 ELISA Kit小鼠GTP KRas 免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDE1 ELISA Kit小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
狂犬病病磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDI1 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
黑曲霉磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GBP5 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
雙孢蘑菇磷化相關死亡促進因子抗體Human GDI2 ELISA Kit小鼠FAM84A蛋白(FAM84A)免疫試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝)肌動蛋白樣蛋白6A抗體Human GBP6 ELISA Kit小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒
佛羅里達側耳磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GCAT ELISA Kit小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒
玫煙色棒束孢磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GAS8 ELISA Kit小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
香菇障礙自整合蛋白BAF抗體Human GATA1 ELISA Kit小鼠E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒
網紋馬勃磷化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體Human GATA3(GATA Binding Protein 3) ELISA Kit小鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
劉氏菌屬磷化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體Human GATA6 ELISA Kit小鼠D-乳免疫試劑盒
微白黃鏈霉菌磷化B-Raf抗體Human GATAD2B ELISA Kit小鼠D-甘油3-磷免疫試劑盒
碗狀瘤杯菌磷化B-Raf抗體Human GATC ELISA Kit小鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化B-Raf抗體Human GBA2 ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移3B(DNMT3B)免疫試劑盒
無磷化B-Raf抗體Human GATM ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移3A(DNMT3A)免疫試劑盒
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質量規格:>0.1 U/mg,BCβ,β胡蘿卜9',10'加氧試劑盒七葉樹皂苷B
曲霉屬Aspergillus│sp. 質量規格:染料含量:>80%,BSα-烯化試劑盒8-去乙酰基滇烏堿
扁刺齒菌Steccherinum│rawakense (Pers.) Banker 質量規格:>98%,BRα戊二脫氫試劑盒羥基吳茱萸堿
黑色標本保色液北里胞 N-Boc-酪D-乳酸脫氫Elisa
海南根瘤 2-氨基-2',4'-二氟苯乙酮EndoglinElisa
對照液 2-酰E鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白Elisa
隆紋黑蛋巢 四氫堿鹽酸鹽E選擇Elisa
福氏志賀氏 三羥甲基烷-三[3-(2-甲基吖啶基)酸酯]GATA結合蛋白3Elisa
釀酒酵母 1-基哌二氫GRO;KCElisa
早熟禾鐮孢 4-環己基嗎啉III型前膠原Elisa
黃海海桿狀 1,2-二氟-3-苯IV型膠原Elisa
暗擬莖點霉 硝酸奧昔康唑IX型膠原Elisa
水堿 降烯-2,3-二羧基亞基叔丁基碳酸酯IκB激-βElisa
腐皮鐮孢 4--5-羥基3(2H)-噠I型膠原Elisa
米曲霉疏展變種 2-氟-4-苯肼鹽酸鹽I型膠原羥基端肽β降解產物Elisa
平臍蠕孢 3-硝基鄰苯二甲酸酐I型膠原羧基端前肽Elisa
鞘氨單胞 5-溴苯酞I型前膠原羧基端肽Elisa
Massilia namucuonensis 3-氟甲酯I型前膠原N端前肽Elisa