詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:MELK抑制劑
英文名稱:OTSSP167 hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
OTSSP167hydrochloride是一種高效的MELK抑制劑,IC50值為0.41nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1431698-10-0 別名:MELK inhibitor 純度:99.80% 分子量:523.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
強雄腐霉SH2結構域蛋白3A抗體Human TPO(Thrombopoietin) ELISA Kit肌紅蛋白(MYO/MB)
假蜜環菌轉化神經突起蛋白抗體Human LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit肌紅蛋白(MB)
血紅鞘鞍單胞菌NPIP樣蛋白1抗體Human TSH(Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit肌酐(Cr)
黑曲霉老年性癡呆蛋白APH2抗體Human Surv(Survivin) ELISA Kit肌鈣蛋白T(Tn-T)
乳粉 三聚神經凋亡調節轉化蛋白1抗體(前蛋白轉化枯草溶菌9)Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
根瘤菌G蛋白偶聯受體147抗體Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)
土味鏈霉菌孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit饑餓激(GHRL)
微小桿菌磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit活性氧(ROS)
構巢曲霉核凋亡誘導因子蛋白1Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit活化受體樣激1(ALK1)
釀酒酵母谷受體2C抗體Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit活化A(ACV-A)
聚生殼菌酪激B抗體Human REN(Renin) ELISA Kit活化凝血因子X(FXa)
雜色曲霉NADPH氧化4抗體Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)
無核分布基因E同源蛋白1抗體Human PD-1/PDCD1(Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit活化蛋白C抵抗(APCR)
大腸埃希氏桿菌絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human POSTN/OSF2(Periostin) ELISA Kit活化蛋白C(APC)
釀酒酵母磷化絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human PRL(Prolactin) ELISA Kit混合系列蛋白激樣結構域(MLKL)
黑白輪枝孢多調控因子1抗體Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit混合淋巴反應封閉因子(MLR-Bf)
極單胞菌Polaromonas│sp. 質量規格:>98%,BR白藜蘆
: GIM3.220資源名稱: 華根霉 質量規格:>98.5%,BR阿魏
茯苓Poria│cocos 質量規格:HPLC>98%,標準品二氫楊梅
MELK抑制劑魯氏接合酵母 脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養基白介8Elisa
酮叢毛單胞 沙氏葡萄糖瓊脂(含霉)白介23Elisa
總狀共頭霉 瓊脂培養基B乙型肝炎病表面抗原Elisa
釀酒酵母 YEP培養基乙型肝炎E抗原Elisa
葡萄盤孢 Slanetz和Bartley培養基甲狀旁腺Elisa
淡紫擬青霉 NAC瓊脂培養基降鈣Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 NAC液體培養基25羥基維生DElisa
曲霉 SPYE肉湯骨特異性堿性磷酸Elisa
葡萄汁有孢漢遜酵母 FS培養基球蛋白AElisa
釀酒酵母 梭強化培養基球蛋白GElisa
栗疫 酸化MRS瓊脂(AMRSA)球蛋白MElisa
鏈球(不定種) 酸化MRS瓊脂(AMRSA)褪黑Elisa
華麗黃鏈霉 瓊脂培養基K(XLD瓊脂)皮質Elisa
枯草芽孢桿 乳糖肉湯培養基睪酮Elisa
褐革 α-D-(+)-塔羅糖孕酮Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)