詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Furosemide | 1mL(10mM)|1g|5g | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Furosemide(Lasix)是Na+/2Cl-/K+(NKCC)共轉運通道抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:54-31-9 純度:99.56% 分子式:C??H??ClN?O?S 分子量:330.74 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
布氏假單胞菌法尼基二磷合1抗體Human TCF7L1 ELISA Kit大鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母鳥嘌呤核苷結合蛋白1抗體Human TCF7 ELISA Kit大鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)免疫試劑盒
青霉膠質纖維性蛋白GFAPδ抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) ELISA Kit大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒
西洋參銹腐病菌β半乳糖苷抗體Human TCERG1 ELISA Kit大鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒
伯頓生絲畢赤酵母巨軸索蛋白GAN抗體Human TCHP ELISA Kit大鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒
煙色曲霉G蛋白偶聯受體結合蛋白O亞基A2抗體Human TCF12/HEB ELISA Kit大鼠巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
日本曲霉高爾基體轉運蛋白1A抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種自主生長因子1B抗體Human TBX15 ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒
釀酒酵母GLCNE蛋白抗體Human TBX18 ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
費氏檸檬桿菌半乳糖凝集9抗體Human TBX21/T-bet ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌富含亮蛋白LRP130抗體Human TBX22 ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
檸檬明串珠菌蛋白轉運抑制劑GBF1抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
貝形側耳高爾基體膜蛋白GP73抗體Human TBX5 ELISA Kit大鼠巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)免疫試劑盒
釀酒酵母葡萄糖轉運蛋白1抗體Human TCF12/HEB ELISA Kit大鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
泡盛曲霉G蛋白結合蛋白2抗體Human TCEB1 ELISA Kit大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
黑曲霉G蛋白結合蛋白2抗體Human TCEB3 ELISA Kit大鼠精脲水解(AGMAT)免疫試劑盒
生二鏈霉菌Streptomyces│ambofaciens 質量規格:分析標準品知母皂苷E
傳染性喉氣管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 質量規格:分析標準品知母皂苷B
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質量規格:分析標準品白綿馬AP
Na+/2Cl-/K+(NKCC)共轉運通道抑制劑莪術二(標準品)英文名稱: Graphite powderFBXO28蛋白抗體包裝5g
莪術呋喃二烯英文名稱: Hexylene glycolFBXW5蛋白抗體包裝1g
莪術烯(標準品)英文名稱: HMPA, hexamethylphosphoramideFBXW12蛋白抗體包裝5g
鵝不食草(標準品)英文名稱: Hydrindantin hydrateFBXO42蛋白抗體包裝1g
厄弗酚英文名稱: Hydroxypropyl celluloseFasL抗體包裝250mg
餓螞蝗(標準品)英文名稱: Indoxyl-Gal原纖維蛋白1抗體包裝5g
蒽醌(標準品)英文名稱: Indoxyl-Glucuronide胰腺衍生因子抗體包裝1g
兒茶(兒茶)(標準品)英文名稱: Iodobenzene性成纖維生長因子抗體包裝5g
兒茶沒食子酯英文名稱: Iron (II) sulfide8/第八/第八因子相關抗原抗體包裝1g
二基庚烷A(標準品)英文名稱: Iron (II,III ) oxide8/第八/第八因子相關抗原抗體包裝1g
二羥茶堿(標準品)英文名稱: Iron (III) oxideFas死亡結構域相關蛋白包裝5g
二氫丹參I(標準品)英文名稱: ron powder reduced胰腺衍生因子抗體包裝100ml
二氫辣椒堿(標準品)英文名稱: Isophorone補體因子H抗體包裝25ml
二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯(標準品)英文名稱: Isovanillin磷化Fas死亡結構域相關蛋白抗體包裝1g
二氫歐山芹當歸酯(標準品)英文名稱: IsovanillinFas相關1因子抗體包裝5g