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Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒

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更新時間:2022-04-21 16:14:48瀏覽次數:299

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 100T
貨號 GOY-01X9885 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒公司*的產品:thrombin II 凝血Ⅱ抗體對-β-D-吡喃半乳糖苷 98%
phospho-p38MAPK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) 化p38MAPK抗體4--β-D-吡喃葡萄糖苷 98%
Tie1 血管生成受體1抗體4--2-酰氨-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%
Thy-1/CD90 CD90抗體

詳細介紹

產品屬性:

中文名稱:Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒

英文名稱:

產品規格:100T

發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研

商品介紹:

用途:

流式細胞術檢測細胞凋亡與細胞壞死

注意事項:

Hoechst33258能被活細胞攝取,與DNA結合,在紫外線下呈藍色熒光。PI使死細胞著色產生紅色熒光。在散點圖上結果為:正常細胞呈低藍/紅光,凋亡細胞呈高藍/低紅光,壞死細胞呈低藍/高紅光。

儲存條件:-20℃,避光,12個月

細胞生物學研究有以下幾個方面:

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調控;

⑤細胞分化及其調控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

糯稻根(標準品)英文名稱: Chlortoluron solutionG蛋白偶聯受體115抗體包裝1g

歐當歸內酯A(標準品)英文名稱: DiuronG蛋白偶聯受體10抗體包裝5g

歐夾竹桃苷(標準品)英文名稱: Clofentezineβ-葡萄糖腦苷脂抗體包裝1g

歐前胡(標準品)英文名稱: Fenuron半乳糖凝集相關蛋白A抗體包裝250mg

藕節(標準品)英文名稱: Daminozide半乳糖凝集12抗體包裝5g

盤龍參(標準品)英文名稱: DEETγ基丁運載蛋白3抗體包裝100g

螃蟹(標準品)英文名稱: TerbumetonGTPIMAP家族成員1抗體包裝25g

胖大海(標準品)英文名稱: ThifluzamideGTPIMAP家族成員2抗體包裝5g

佩蘭(標準品)英文名稱: TsumacideGTPIMAP家族成員3抗體包裝1g

蟛蜞菊內脂;蟛蜞菊內酯(標準品)英文名稱: TerbuthylazineGTPIMAP家族成員4抗體包裝5g

披麻草(標準品)英文名稱: Tri-tert-butylphosphineGTPIMAP家族成員5抗體包裝25g

枇杷葉(標準品)英文名稱: TebufenpyradG蛋白調節誘導神經突增生蛋白2抗體包裝5g

片姜黃(標準品)英文名稱: 1-NaphthaleneacetamideGTPIMAP家族成員7抗體包裝1g

平貝母(標準品)英文名稱: ThiaclopridGTPIMAP家族成員8抗體包裝25g

坡模-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯英文名稱: Tricyclazol solutionG蛋白調節誘導神經突增生蛋白1抗體包裝5g

細腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質量規格:>98%,標準品牛小腸堿性磷試劑盒沒食子酯;Propyl gallat

白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質量規格:>98%牛奶過敏原特異性IgE抗體芒果苷;Mangiferin

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規格:>99%,USP34,BR,可用于培養牛兒基焦磷合試劑盒沒食子;Gallic acid
Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒朱紅鏈霉 3-氯喹啉H1N1流感IgA抗體Elisa

煙曲霉 (R)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮H1N1流感IgG抗體Elisa

越桔假絲酵母 反式-4-(4-基環己基)苯H1N1流感IgM抗體Elisa

巨孢毛霉 2-硝基-5-氯H3N2流感IgA抗體Elisa

兩型孢毛霉 2,4-二氯-5-甲氧基苯H3N2流感IgG抗體Elisa

扣囊復膜孢酵母 苯-2,5-二磺酸H3N2流感IgM抗體Elisa

黑曲霉 苯并呋喃-2-酸尿囊Elisa

大腸埃希 4-(Boc-氨基)吡啶半乳糖凝集3Elisa

枯草芽孢桿 BOC-D-3-(3-吡啶基)-氨酸嗅覺受體1J1Elisa

溜曲霉 2,6-二氯-4-吡啶奧曲肽Elisa

球孢白僵 Estradiol valerate整合α4β1Elisa

金針菇F5 2'-羥基苯酮羧肽A4Elisa

鼠李糖乳桿 替考拉寧酪氨酸蛋白激受體A4Elisa

膠囊青霉 4-羥基鄰苯二甲酸低密度脂蛋白受體相關蛋白4抗體Elisa

深紅酵母 N-BOC-3-氨基環己泛結合E2Elisa 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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