詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:細胞增殖與毒性檢測試劑盒(CCK-8)
英文名稱:
產品規格:100次/500次/3000次/10000次
發貨周期:1~3天
商品介紹:
產品原理: Cell Counting Kit(細胞增殖與毒性檢測試劑盒)是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒,其性能優于目前市面上進口的CCK-8試劑盒。 WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被還原生成橙黃色水溶性的甲臜(Formazan)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。 產品優勢: 可用于細胞因子誘導的細胞增殖檢測、抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測、一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測;操作方法非常便捷、快速。 保存條件:4°保存一年,-20°兩年。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
泛鈣,維生B5英文名稱: Indapamide4號染色體開放閱讀框51抗體包裝1g
泛鈉(標準品)英文名稱: Indapamide分支GBE1抗體包裝25g
泛昔洛韋(標準品)英文名稱: Iopamidol磷化絲切蛋白抗體包裝5g
泛影(標準品)英文名稱: Iopamidol補體成分5受體1抗體包裝1g
非布索坦(標準品)英文名稱: Loperamide HCl分裂周期2樣蛋白激6抗體包裝250mg
非洛地平(標準品)英文名稱: Loperamide HCl補體C3IP1抗體包裝5g
非洛地平雜質Ⅰ(標準品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 磷化周期檢測點激2抗體包裝500mg
非那西丁(標準品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 周期依賴性激11抗體包裝1g
非諾貝特雜質Ⅰ(標準品)英文名稱: Lansoprazole 周期依賴性激10包裝5g
非諾貝特雜質Ⅱ(標準品)英文名稱: Lansoprazole 8號染色體開放閱讀框86抗體包裝100g
非諾洛芬鈣(標準品)英文名稱: L base磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝10g
非普拉宗(標準品)英文名稱: Levonorgestrel磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝25g
芬達唑;硫咪唑(標準品)英文名稱: Levonorgestrel磷化半胱蛋白蛋白6抗體包裝25MG
芬布芬(標準品)英文名稱: Levosulpiride9號染色體開放閱讀框172抗體包裝100g
酚磺乙(標準品)英文名稱: Levosulpiride磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑包裝25g
: AS3.16資源名稱: 曲霉 質量規格:>98.0%,JP2002胸苷合成試劑盒五味子酚;Schisanhenol
糖霉菌Glycomyces│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品性激結合球蛋白試劑盒衛矛;Dulcitol
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規格:>98.5%性別決定區Y蛋白試劑盒1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄
細胞增殖與毒性檢測試劑盒(CCK-8)大腸埃希 3-氯磺酰基-4-氟沙眼衣原體IgMElisa
玉米黑粉 4-氯苯磺酰脲肝Elisa
香菇Cr04 β-內啡肽,鼠前腦源性神經營養因子Elisa
大腸埃希氏桿 2,5-二氟苯皰疹病-8型感染IgG抗體Elisa
尖孢鐮孢 甲基烯酸十二氟庚酯皰疹病-8型感染IgM抗體Elisa
彩色豆馬勃 2-(甲硫基)乙酰單純皰疹病1IgG抗體Elisa
熒光假單胞 Cys-Gly, oxidized單純皰疹病1IgM抗體Elisa
尖孢鐮刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗體Elisa
扁柄側耳 2-氯-4-氟巨病IgM抗體Elisa
紅曲紅曲 2-氯-5-氟單純皰疹病2IgG抗體Elisa
褐囊蜜環 4-氨基-3-氟吡啶人類嗜T病抗體Elisa
釀酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-羥基吡啶-2-羧酸核糖核酸HElisa
黑曲霉 2-羥基甲酯EB病抗體Elisa
釀酒酵母 2-苯氧基血吸蟲抗體Elisa