商品介紹:
英文名稱:Go 6983 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Go6983是一種有效的的PKC抑制劑,能夠作用于PKCα,PKCβ,PKCγ,PKCδ和PKCζ,IC50值分別為7nM,7nM,6nM,10nM和60nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):133053-19-7 別名:G? 6983;Goe 6983 純度:98.0% 分子量:442.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PKC抑制劑(Go 6983) | Go 6983 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
庫德里阿茲威畢赤酵母凝血因子5抗體Human DCK (Deoxycytidine kinase) ELISA KIT牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌胡麻專化型成纖維生長因子10抗體Human CDH7(Cadherin-7) ELISA Kit牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體Human DGUOK (Deoxyguanosine kinase, mitochondrial) ELISA KIT牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgA)免疫試劑盒
Ochrobactrum羊抗人纖維蛋白原抗體Human MTRNR2L6(Humanin-like protein 6) ELISA Kit牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒
米曲霉Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human DAAM2 (Disheveled-associated activator of morphogenesis 2) ELISA KIT牛血清白蛋白(ALB)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬F-box蛋白38抗體Human DOHH (Deoxyhypusine hydroxylase) ELISA KIT牛血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR-3)免疫試劑盒
食砜節(jié)桿菌FK506結(jié)合蛋白38抗體Human PVALB(Parvalbumin alpha) ELISA Kit牛血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human DERA (Deoxyribose-phosphate aldolase) ELISA KIT牛雄烯二(ASD)免疫試劑盒
釀酒酵母Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human DEPTOR (DEP domain-containing mTOR-interacting protein) ELISA KIT牛新包蟲抗體免疫試劑盒
韓國成對(duì)桿菌F-box蛋白21抗體Human DCAKD (Dephospho-CoA kinase domain-containing protein) ELISA KIT牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)免疫試劑盒
淡紫擬青霉GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體Human HELQ (Helicase POLQ-like) ELISA KIT牛心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母胎球蛋白B/Fetuin β抗體Human PRKDC (DNA-dependent protein kinase catalytic subunit) ELISA KIT牛心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌叉頭蛋白O1抗體Human CYP4F2 (Phylloquinone omega-hydroxylase CYP4F2) ELISA KIT牛腺病3(ADV3)抗體(IgG)免疫試劑盒
假單胞菌鐵蛋白重鏈抗體Human GAD1(Glutamate decarboxylase 1) ELISA Kit牛纖維蛋白原(Fb)免疫試劑盒
葡枝根霉類固受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體Human CYTIP (Cytohesin-interacting protein) ELISA KIT牛纖連蛋白(FN)免疫試劑盒
易脆毛霉纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT牛纖調(diào)蛋白(FMOD)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品異佛手柑內(nèi)酯
深海彎曲菌Thalassolituus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0%異補(bǔ)骨脂查爾
玫瑰黃鏈霉菌Streptomyces│roseoflavus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異補(bǔ)骨脂二氫黃
PKC抑制劑(Go 6983)小葉相思根瘤 2-氨基-4-吡啶晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
不高雙孢 吡啶-2-酸心鈉肽Elisa
藍(lán)微褐鏈霉 2',5'-二氟苯乙酮干擾γ誘導(dǎo)蛋白Elisa
三孢布拉霉 4-甲基-3,5-二甲基異噁唑白介15Elisa
球孢白僵 5-甲基異惡唑-3-羧酸甲酯干擾誘導(dǎo)蛋白10Elisa
食砜節(jié)桿 (S)-(-)-二氨基烷 糖化血紅蛋白Elisa
新城疫病 Amiodarone hydrochloride球蛋白G Fc段Elisa
串珠鐮孢 3,4-二苯肼鹽酸鹽降鈣基因相關(guān)肽Elisa
釀酒酵母 N-Fmoc-N-甲基-O-叔丁基-L-絲氨酸阿瓦斯丁Elisa
中國蜜環(huán) 2-溴-3-硝基吡啶白介12Elisa
血耳* 3,5-二-1-溴苯鈣蛋白Elisa
釀酒酵母 4-羥基苯甲酰甲水合物鈣蛋白Elisa
果生鏈核盤 2-肼基-4-三氟甲基嘧啶總膽紅Elisa
ATCC 12980 6-硝基啉粒集落激因子抗體Elisa
貝萊斯芽胞桿 (R)-(+)-2-甲基-2-亞磺酰間接膽紅Elisa