詳細介紹
商品介紹:
Wnt-C59有效抑制PORCN酶活性和Wnt。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1243243-89-1 別名:C59 純度:99.83% 分子量:379.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Wnt-C59
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
薄層菌肌單磷IMPA3抗體Human RPL31 ELISA Kit魚白介4(IL-4)免疫試劑盒
紅色紅曲霉整合αVβ6抗體Human RPL35 ELISA Kit魚白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
葡萄座腔菌白介11受體α/IL-11Rα抗體Human RPL39 ELISA Kit魚白介12(IL-12)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬免疫球蛋白樣結構域受體1抗體Human RPL21 ELISA Kit魚白介10(IL-10)免疫試劑盒
禾赤鐮孢KB抑制蛋白激α/β抗體 IKK α/IKK βHuman RPL22 ELISA Kit魚γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
Debaryomyces prosopidis干擾α11抗體Human RPL23 ELISA Kit魚CD8分子(CD8)免疫試劑盒
土曲霉干擾α10抗體Human RPH3A ELISA Kit魚CD4分子(CD4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌干擾α受體2抗體Human RPH3AL ELISA Kit魚5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒
樹舌干擾α21抗體Human RPL23A ELISA Kit魚Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
飼料類芽孢桿菌干擾α4抗體Human RPL24 ELISA Kit魚17-羥孕烯免疫試劑盒
慢生根瘤菌干擾α16抗體Human RPL10 ELISA Kit魚17-α甲睪(17-αMT)免疫試劑盒
香菇衍生透明質相關蛋白抗體Human RPL26L1 ELISA Kit魚17α,20β羥基孕(17α,20βOH-PROG)免疫試劑盒
ATCC 700324肌聚磷鹽磷樣蛋白1抗體Human RPL28 ELISA Kit魚11-類固免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌胰島誘導基因2抗體Human RPL3 ELISA Kit魚11-睪(KT)免疫試劑盒
截形炭團菌HHG2抗體Human RPL30 ELISA Kit魚(鮭魚)瘦(LEP)免疫試劑盒
球孢白僵菌干擾α17抗體Human RPL31 ELISA Kit羊
漢遜德巴利酵母Debaryomyces│hansenii 質量規格:分析標準品獐牙菜苷
反硝化鹽單胞菌Halomonas│denitrificans 質量規格:分析標準品烏金苷
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質量規格:分析標準品,98%重樓皂苷VII
PORCN酶活性和Wnt抑制劑(Wnt-C59)細孢毛霉 聚乙烯亞C-反應蛋白Elisa
釀酒酵母 DL-乙硫氨酸D-乳酸鹽Elisa
棘青霉 嗎啉乙磺酸(無水)α1酸性糖蛋白Elisa
產氣莢膜梭 C型 植物凝膠αS1酪蛋白Elisa
異配囊接霉 4-基-β-D-纖維二糖苷αS2酪蛋白Elisa
釀酒酵母 3-甲基腺嘌呤α半乳糖苷Elisa
微白黃鏈霉 穿心蓮內酯α干擾Elisa
產氣莢膜梭 D型 黃苷-5'-單磷酸鈉α酪蛋白Elisa
里氏木霉 辛癸酸甘油酯β淀粉樣蛋白1-40Elisa
紫色鏈霉 單硬脂酸鋁β淀粉樣蛋白1-42Elisa
多量毛霉 亞油酸甲酯β干擾Elisa
構巢曲霉 雌酚酮β-肌動蛋白Elisa
枯草芽孢桿 5-甲基糠β酪蛋白Elisa
嗜麥芽黃單胞 磷酸氫二鈉,二水β-羥基丁酸Elisa
被孢屬 6-溴吡啶-3-酸β-羥基丁酸Elisa