詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
BYL-719 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:BYL-719 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg BYL-719是一種有效的選擇性PI3Kα抑制劑,IC50為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1217486-61-7 別名:Alpelisib 純度:99.04% 分子量:441.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
淺灰綠色鏈霉菌磷化α-連環蛋白抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖6磷異構(GPI)免疫試劑盒
白肉迷孔菌周期E2抗體Human GAD-Ab(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
印度毛殼磷化鈣/鈣調依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體Human GAL12(Galectin 12) ELISA Kit人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)免疫試劑盒
煙管菌腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL8(Galectin 8) ELISA Kit人破傷風(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒
蘋果鏈格孢(蘋果斑點落葉病菌)磷化腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL14(Galectin 14) ELISA Kit人蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒
貴州綠僵菌磷化CREB-1抗體Human GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit人平滑肌肌動蛋白(SMA)免疫試劑盒
土曲霉磷化CREB-1抗體Human GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒
溜曲霉磷化周期依賴性激6抗體Human GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒
尖枝革菌原癌基因CBL2抗體Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit人皮質抑/皮質穩定蛋白(CORT)免疫試劑盒
短鏈諾卡氏菌磷化原癌基因CBL2抗體Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit人皮質/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
赤曲霉β鏈接相互作用蛋白1抗體Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit人皮質-3(Cortxin-3)免疫試劑盒
臭紅菇磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit人皮質類固結合球蛋白(CBG)免疫試劑盒
Pseudomonas fluorescens PfO-1磷化β 連環蛋白抗體Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit人皮質(Cortisol)免疫試劑盒
成團泛菌葉綠體蛋白抗體(植物)Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit人皮膚淋巴相關抗原(CLA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化后期促進復合蛋白3抗體Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人皮膚蛋白(DPT)免疫試劑盒
放射形根瘤菌磷化絲切蛋白抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人皮動蛋白(CTTN)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98%,BSB淋巴抗原試劑盒次大風子
鴨疫里氏桿菌Riemerella│anatipestifer 質量規格:>98%,BRblca-4 次
: IOCM30資源名稱: 豇豆慢生根瘤菌 質量規格:>98%,BRblca-1 催吐蘿芙木定
PI3Kα抑制劑(BYL-719)谷氨酸棒桿 6-羥基煙酸轉化生長因子Elisa
四川散斑殼 3-甲酸乙酯IV型膠原Elisa
遼寧盤孢 氫化可的槍乙酸因子信號轉導抑制因子1Elisa
大腸埃希氏 吡啶-3-甲8-異前列腺F2Elisa
昆明假諾卡氏 α-鄰苯乙酮核轉錄因子p65Elisa
球孢鏈霉球孢亞種 3-氟-5-硝苯胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1Elisa
寒冷桿 3-甲酸單氨氧化AElisa
馬賽博斯氏 降烯乳酸脫氫同工-XElisa
托魯斯山鏈霉 N-(3-氨基基)二乙乙酰氧化Elisa
深紅酵母 二乙基酮肉堿脂酰轉移IαElisa
水單胞 環戊二烯基鈉甘油-3-磷酸?;D移Elisa
環狀芽胞桿 4--2-甲硫基嘧啶白介2可溶性受體α鏈Elisa
黑腐皮殼 2,4-二-5-硝基嘧啶I型前膠原氨基端肽Elisa
金霉鏈霉 1,6-脫水-β-D-葡萄糖蛋白質羰基化合物Elisa
秦氏蜜環 1,2,3,4-四氫-1-萘鹽酸鹽蛋白質亞硝基化Elisa