商品介紹:
Afatinib dimaleate是一種不可逆的EGFR/HER2抑制劑,有效作用于野生型和突變型EGFR和HER2,作用于EGFRwt,EGFRL858R,EGFRL858R/T790M和HER2,IC50分別為0.5nM,0.4nM,10nM和14nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):850140-73-7 別名:BIBW 2992MA2;BIBW2992;Afatinib 純度:99.81% 分子量:718.08 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR/HER2抑制劑
英文名稱:Afatinib dimaleate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
樟疫霉血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Human RPS19(Ribosomal protein S19) ELISA Kit魚肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒
深層大洋芽孢桿菌白介17受體C抗體Human RPS20 ELISA Kit魚鈣調(diào)磷(CaN)免疫試劑盒
病臭腸球菌免疫球蛋超家族成員8抗體Human RPP21 ELISA Kit魚酚氧化(PO)免疫試劑盒
薄花邊傘2-4白介33抗體Human RPLP0 ELISA Kit魚多巴(DA)免疫試劑盒
玉米大斑病菌核蛋白9抗體(Ran結(jié)合蛋白M)Human RPP38 ELISA Kit魚膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
蟲形珊瑚菌真核翻譯起始因子3A抗體Human RPP25 ELISA Kit魚催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
熒光假單胞菌磷化真核翻譯起始因子4G抗體Human RPRD1B ELISA Kit魚促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種整合α4β7抗體Human RPL7L1 ELISA Kit魚促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
Candidatus Rhizobium磷化干擾調(diào)節(jié)因子3抗體Human RPS10 ELISA Kit魚雌二(E2)免疫試劑盒
節(jié)桿菌ISLR2蛋白抗體Human RPL8 ELISA Kit魚超氧化物歧化(SOD)免疫試劑盒
動(dòng)物雙歧桿菌IQCG蛋白抗體Human RPLP0 ELISA Kit魚補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌IQCK蛋白抗體Human RPL9 ELISA Kit魚補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌DNA結(jié)合抑制因子1抗體Human RPL9 ELISA Kit魚胞漿型磷脂A2A(cPLA2A)免疫試劑盒
氏針層孔菌肌苷單磷脫氫1抗體Human RPL8 ELISA Kit魚白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
深紅酵母干擾誘導(dǎo)蛋白P78抗體Human DPP3(Dipeptidyl peptidase 3) ELISA Kit魚白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
堿線菌屬間粘附分子5抗體Human RPL32 ELISA Kit魚白介6(IL-6)免疫試劑盒
密叢毛霉Mucor│plumbeus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%川陳皮
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品石杉?jí)A
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品豆腐果苷
EGFR/HER2抑制劑藻苔金黃桿 四化銥(IV) 水合物葡萄糖-6-磷酸Elisa
弱黃色粘球 化釔(III) 六水合物磷酸烯式酮酸羧激1Elisa
Pseudomonas argentinensis 化銥(III)磷酸烯式酮酸羧激2Elisa
小白孢枝瑚 三化鐵(III) 六水合物己糖激2Elisa
化鉺(III) 六水合物己糖激1Elisa
泡盛曲霉 化鏑(III)己糖激3Elisa
匍匐曲霉原變種 高酸鋅,六水6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
假絲酵母屬 硝酸鎘,四水糖原合成Elisa
猴頭菇 鋨酸 二水合物糖酵解相關(guān)磷酸果糖激Elisa
白僵 (R)-(+)-苯乙酮酸羧基Elisa
腸沙門氏腸亞種傷寒血清型 烯鹽酸鹽谷氨酰果糖-6-磷酸轉(zhuǎn)氨2Elisa
酵母屬 4-二苯并呋喃酸谷氨酰果糖-6-磷酸轉(zhuǎn)氨1Elisa
短密青霉 (S)-(-)-2, 2-雙(二對(duì)甲苯基膦)-1,1-二聯(lián)萘萊姆病IgG抗體Elisa
瑞氏假絲酵母 乙酸Ⅰ型膠原C端肽Elisa
木拉克酵母屬 維生A醋酸酯Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽Elisa