詳細介紹
商品介紹:
用途: 用于網織紅細胞活體染色 注意事項: 背景清楚,顏色鮮亮 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
50ml|100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細辛脂(標準品)英文名稱: L-Histidine艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體包裝5g
細葉遠志皂苷(標準品)英文名稱: L-Alanine艾滋病病抗體包裝25g
夏佛塔苷(標準品)英文名稱: L-Tyrosine艾滋病病-1包膜糖蛋白抗體包裝1g
夏枯草(標準品)英文名稱: L-Tyrosine磷化組蛋白H3抗體包裝1g
夏天無(標準品)英文名稱: L-Glutamic acid短鏈L-3羥烷基脫氫抗體(小鼠,大鼠)包裝25g
仙鶴草(標準品)英文名稱: L-Glutamic acid同源盒蛋白HOXD10抗體包裝5g
仙鶴草酚B(標準品)英文名稱: L-Glutamic acidHHIP樣蛋白1抗體包裝100ml
仙茅(標準品)英文名稱: DL-Glutamic acid monohydrateHOXA10抗體包裝1g
仙茅苷(標準品)英文名稱: Sarcosine 促黃體生成受體抗體包裝25g
仙人掌(標準品)英文名稱: Glycyl-DL-leucineHER2受體抗體(N端)包裝5g
纖細薯蕷(標準品)英文名稱: AlliinHER2受體抗體包裝100g
相思子(標準品)英文名稱: L-ProlineA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝25g
相思子堿(標準品)英文名稱: DL-Valine人絨毛膜促性腺激α亞基/hCG α 抗體包裝5g
香草(標準品)英文名稱: L-Leucine 乙酰肝抗體包裝1mg
香橙(標準品)英文名稱: L-Leucine組蛋白H3樣蛋白抗體包裝1g
嗜熱紅短芽孢桿菌Brevibacillus│thermoruber 質量規格:HPLC>98%,標準品免疫球蛋白A試劑盒連翹苷;Forsythin
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質量規格:>98.5%,BR免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ試劑盒魯斯可皂苷元;Ruscogenin
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC>98%,標準品免疫核糖核試劑盒蘆薈苷;barbaloin
網織紅細胞染色液麥克默多生孢八疊球 5-硝基靛酸化脾臟酪氨酸激Elisa
球形芽孢桿 2-氯甲酯抗壞血酸過氧化物Elisa
短芽孢桿 5-硝基-1,2,4-苯補體3A受體1Elisa
水單胞 2-甲基-5-吡啶酸頻吶酯抗心肌IgM抗體Elisa
紅曲霉 2-硝基-1,4-苯二甲酸肌聚多糖-β基因Elisa
Tardiphaga 六氫鄰苯二甲酸肌聚多糖-a 基因Elisa
Phytophthora syringoe 3-甲氧基肉桂酸生長分化因子8Elisa
草菇 苯乙雙胍鹽酸鹽HIV核心抗原P24Elisa
梭孢環柄菇 2-氯苯甲酰G蛋白偶聯雌受體1Elisa
Bacillus humi 2,4-二磺酰氯鈣調神經磷酸Elisa
松樹土類芽孢桿 N-苯甲酰-L-谷氨酸固受體Err2Elisa
大腸埃希氏 奎寧磷酸糖異構Elisa
博斯氏屬 2-甲基乙酰乙酸乙酯基孔肯尼亞病抗原Elisa
芽孢桿屬 3,5-二甲基異惡唑-4-酸頻哪酯心營養樣因子1Elisa
剛毛絲毛伏革 2-溴異戊酸乙酯銅鋅過氧化物岐化Elisa