商品介紹:
用途: 用于真菌(馬爾尼菲青霉菌)和卡氏肺囊蟲類生物的染色 注意事項(xiàng): 固定,石蠟包埋。真菌、肺囊蟲、黑色素染為棕黑色或黑色,背景為橙黃色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:5×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
印度芽孢桿菌軟骨蛋白聚糖抗體Human LRMP ELISA Kit豬磷激,γ1(肌肉)(PHKG1)免疫試劑盒
釀酒酵母5-基乙酰合1抗體Human LRDD ELISA Kit豬磷化乙酰羧化(pACCase)免疫試劑盒
斑玉蕈p53凋亡激蛋白1抗體Human LRPAP1 ELISA Kit豬磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)免疫試劑盒
木蹄層孔菌P53凋亡激蛋白2抗體Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA Kit豬磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種激活受體2B抗體Human LRRC1 ELISA Kit豬磷甘油酯激2(PGK2)免疫試劑盒
佩特曲霉AIMP2抗體Human LPIN2 ELISA Kit豬藍(lán)耳病(PRRSV)抗體(IgG)免疫試劑盒
膠孢乙??贵wHuman LPHN3 ELISA Kit豬賴酰氧化免疫試劑盒
美麗短芽孢桿菌5-基乙酰合1抗體Human LPPR2 ELISA Kit豬口蹄疫抗體免疫試劑盒
奇異球菌防御α1/3抗體Human LPP ELISA Kit豬口蹄疫抗體(IgM)免疫試劑盒
根瘤菌ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬口蹄疫抗體(IgG)免疫試劑盒
紅曲紅曲植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥)Human LPXN ELISA Kit豬可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒
短桿狀馬賽菌A-Raf抗體Human LRAT ELISA Kit豬可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫試劑盒
傘枝犁頭霉磷化A-Raf抗體Human LPIN2 ELISA Kit豬可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒
摩洛哥芽孢桿菌紅腺苷脫3抗體Human LPP ELISA Kit豬可溶性P選擇(sP-Selectin)免疫試劑盒
囊孔附毛菌雄激結(jié)合蛋白抗體Human LMNB2 ELISA Kit豬抗中性粒彈性蛋白抗體(ANEA)免疫試劑盒
膠孢肝再生增強(qiáng)因子抗體Human LPPR2 ELISA Kit豬巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC補(bǔ)體片段3d試劑盒紫莖女貞苷D
海洋紅嗜熱鹽菌Rhodothermus│marinus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體片段3c試劑盒紫莖女貞苷C
泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體片段3b受體試劑盒紫莖女貞苷B
六胺銀染色液(改良Grocott-橙黃G法)釀酒酵母 甲酸正庚酯促甲狀腺受體Elisa
苛求芽孢桿 異丁酰乙酸乙酯甲狀腺激阻斷抗體Elisa
松口蘑 6--2-羥抗酸性磷酸5bElisa
蠟狀芽孢桿 3-甲氧基-4-甲酸周期依賴性激5Elisa
果生核盤 5-氨基-1-甲基-2(H)-嘧啶酮血紅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 E型 2-乙炔食欲肽Elisa
巴西固氮螺 2,4-二甲氧基-3-甲4-羥雌二Elisa
解鳥氨酸克雷伯氏 2--7H-吡咯[2,3-D]嘧啶Aldo-keto還原家族1成員B10Elisa
黑腐皮殼 4-肼基-3-硝基吡啶ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1型13Elisa
葡萄酒色被孢霉 4--3-硫酸酚Elisa
大腸埃希 6--1,2,3,4-四氫異喹啉胰多肽Elisa
鏈格孢 (S)-(+)-2-吡咯烷酮-5-羧酸乙酯胱硫β-合成Elisa
硫磺 2-氨基-5-溴-3-(羥甲基)吡啶肝炎病抗體Elisa
地霉 磷酸二叔丁酯鹽細(xì)小病抗體Elisa
酒紅鏈霉 4-羥基-3-甲氧基芐.鹽酸鹽呼腸弧病抗體Elisa