詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:自噬抑制劑-1(Spautin-1)
英文名稱:Spautin-1
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Spautin-1是特異的、強效的自噬抑制劑-1。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1262888-28-7 純度:99.02% 分子量:271.26 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解脂亞羅酵母腦紅蛋白/神經血紅蛋白/神經球蛋白抗體Human MBP/MBL(Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)
植物乳桿菌神經激肽A抗體Human IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit甲狀旁腺激1受體(PTH1R)
松衫暗孔菌磷化膜相關蛋白Numb抗體Human S100A1/S100(Protein S100-A1) ELISA Kit甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)
側孢短芽孢桿菌磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human FE(Ferritin) ELISA Kit甲狀旁腺激(PTH)
短芽孢桿菌核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Human sTfR1(Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
釀膿鏈球菌膜相關蛋白Numb抗體Human FPA(Fibrinopeptide A) ELISA Kit甲酰甲硫(fMet)
茄鏈格孢谷受體2A抗體Human TF(Transferrin) ELISA Kit甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)
小煤炱菌屬磷化谷受體2B抗體Human AFP(alpha Fetoprotein) ELISA Kit甲基化(Methylase)
羊邊蟲(綿羊無漿體—永壽株)谷受體2B抗體Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)
下彎巴克斯霉磷化核仁磷蛋白抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) ELISA Kit喋呤(MTX)
黃綠木霉磷化核仁磷蛋白抗體Human PI(Proinsulin) ELISA Kit己糖激3(HK3)
黃海芽孢桿菌磷化核仁磷蛋白抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) ELISA Kit己糖激(HK)
雙孢蘑菇(可訂購)核因子κB抑制蛋白β抗體Human CA-125(CarbohydRate Antigen 125) ELISA Kit幾丁質3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)
絲狀支原體山羊亞種磷化谷受體2A抗體Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit幾丁質1(殼三糖)(CHIT1)
晶粒鬼傘間質衍化因子受體1抗體Human PI(Proinsulin) ELISA Kit集落激因子(CSF)
青色鏈霉菌神經分化因子2抗體Human CA19-9(CarbohydRate antigen19-9) ELISA Kit集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:>95%,BR,M.W:3000防己諾林堿
枯草芽胞桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:>95%,BR,M.W:10000粉防己堿
楚氏喜鹽芽胞桿菌Halobacillus│trueperi 質量規格:>95%,BR,M.W:90000輔Q10
自噬抑制劑-1(Spautin-1)雅氏艾美耳球蟲 雙歧桿BS培養基(不含瓊脂)纖維二糖Elisa
彎曲芽胞桿 動力培養基纖維木糖Elisa
球孢白僵 鄰苯二甲酸二異癸酯糖皮質Elisa
大腸埃希 TGY瓊脂甲狀旁腺Elisa
冬克青霉 RSMA培養基抗酸性磷酸Elisa
Sphingomonas oligoaromativorans 鄰單胞鑒別瓊脂Ⅰ型膠原C端肽Elisa
枯草芽孢桿 硫酸鹽還原專屬培養基(postgate培養基)I型前膠原氨基端肽Elisa
黑木耳 3,4'-二氨基二苯基副流感病Elisa
金針菇(F4-11) 凍干兔血漿脂肪酸合成Elisa
平菇 R3增殖培養基6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
皺褶假絲酵母 沙保羅氏瓊脂硬脂酰去飽和Elisa
苜蓿莖點霉 疊氮磷酸二苯酯(DPPA)酮酸脫氫激4Elisa
秀珍菇 厭氧產氣包口蹄疫病非結構蛋白3ABCElisa
米曲霉疏展變種 多粘B(4ug)骨化二Elisa
黃桿 硫酸新霉(100ug)骨化三Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)