以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PDE4B抑制劑 | GSK256066 2,2,2-trifluoroacetic acid | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
GSK256066(2,2,2-trifluoroacetic acid)是PDE4B抑制劑,IC50為3.2pM,與A-D各亞型親和力相同,比對(duì)PDE1/2/3/5/6和PDE7的抑制性高380000倍和2500倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1415560-64-3 別名:GSK 256066 純度:99.74% 分子量:632.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
綠色木霉粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體Human ZC3HAV1L ELISA Kit雞饑餓激(Ghrelin)免疫試劑盒
阮氏菌生長(zhǎng)抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原樣蛋白抗體Human ZC3HC1 ELISA Kit雞活性氧(ROS)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌腎母瘤基因X染色體蛋白抗體Human ZC3HAV1 ELISA Kit雞活化B(ACV-B)免疫試劑盒
構(gòu)巢曲霉磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體Human ZFP36L2 ELISA Kit雞活化AB(ACV-AB)免疫試劑盒
殼菌腎母瘤X蛋白抗體Human NMT1(Glycylpeptide N-tetradecanoyltransferase 1) ELISA Kit雞活化A(ACV-A)免疫試劑盒
巴斯德酵母α-L巖藻糖苷抗體Human ZCCHC11 ELISA Kit雞黃體生成(LH)免疫試劑盒
博伊丁假絲酵母FbxW2蛋白抗體Human ZFP64 ELISA Kit雞環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
史氏芽孢桿菌Fbxw7蛋白抗體Human ZCCHC6 ELISA Kit雞環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
長(zhǎng)枝木霉FBXW8蛋白抗體Human ZCCHC7 ELISA Kit雞核因子κB受體活化因子(RANK)免疫試劑盒
紅酵母屬人纖維蛋白原單克抗體Human ZFP90 ELISA Kit雞核因子-κB(NF-κB)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母FANCD2抗體Human ZCCHC8 ELISA Kit雞過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA 免疫試劑盒
壁芽孢桿菌磷化FANCD2抗體Human TAC3(Tachykinin-3) ELISA Kit雞過(guò)氧化物體增殖因子活化受體B(PPAR-B)免疫試劑盒
犬種布魯氏菌外基質(zhì)蛋白FREM2抗體Human ZCRB1 ELISA Kit雞過(guò)氧化物體增殖因子活化受體A(PPAR-A)免疫試劑盒
油菜菌核病菌面肩肱型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥相關(guān)蛋白FRG1抗體Human ZDHHC13 ELISA Kit雞過(guò)氧化氫免疫試劑盒
豌豆根瘤菌CD350抗體Human ZDHHC15 ELISA Kit雞谷胱甘肽過(guò)氧化物8(GPX-8)免疫試劑盒
花楸藤氏酵母CD344抗體Human ZDHHC5 ELISA Kit雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)免疫試劑盒
: =ATCC33320=CUETM77-167=CIP80-31.資源名稱: 鄉(xiāng)間布丘氏菌 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml林澤蘭內(nèi)酯B
喇叭菌Craterellus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCl蒲公英甾乙酯
鹽漬微菌Salimicrobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO315-羥基松香
PDE4B抑制劑鹽米安色林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PantoprazoleSodium Sesquihydrate橋粒芯蛋白3抗體包裝5g
鹽米諾環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PantoprazoleSodium Sesquihydrate癌基因刪除蛋白2抗體包裝100g
鹽米托蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (s)-10-hydroxycamptothecinDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體包裝25g
鹽莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (s)-10-hydroxycamptothecin癌相關(guān)蛋白DRES17抗體包裝5g
鹽莫西沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liquiritigenin周期調(diào)控蛋白SDP35抗體包裝1g
鹽奈福泮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liquiritin apiosideDNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體包裝25g
鹽萘唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoliquiritin apioside腦發(fā)育同源蛋白1抗體包裝5g
鹽萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chelerythrine間粘附分子非整合蛋白3抗體包裝25g
鹽尼非卡蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NVP-TAE684膜蛋白Derlin抗體包裝5g
鹽尼卡地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Artemisic acid二脂酰甘油酰基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
鹽尼卡地平雜質(zhì)(2,6-二基-4-(3-基)...英文名稱: Fangchinoline轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體包裝5g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Solasurine間粘附分子非整合蛋白3抗體包裝1g
鹽帕洛諾司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sparteini SulfasDNA依賴性蛋白激抗體包裝250g
鹽侖西平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (-)-Sparteini Sulfas磷化DNA依賴性蛋白激抗體包裝500g
鹽唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Synephrine磷化DNA依賴性蛋白激抗體包裝25g