詳細介紹
商品介紹:
英文名稱:5-Azacytidine 產品規格:1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg 5-Azacytidine是一種胞苷類似物,通過限制DNA甲基轉移酶來抑制DNA甲基化。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:320-67-2 別名:Ladakamycin;5-AzaC;Azacitidine 純度:98.24% 分子量:244.2 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
5-Azacytidine | 1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
平菇胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒
螺卷毛殼19號染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒
鮮綠青霉過氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羥基賴正己(HLNL)免疫試劑盒
釀酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羥脯(Hyp)免疫試劑盒
米曲霉第12號染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人強啡肽(Dyn)免疫試劑盒
釀酒酵母γ-連環/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潛伏轉化生長因子β結合蛋白2(LTBP2)免疫試劑盒
日勾維腸桿菌10號染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫試劑盒
中國克魯維酵母10號染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒
黃色短桿菌10號染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒
猴頭菌19號染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纖維蛋白1免疫試劑盒
金黃殼囊孢19號染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前鐵調(Pro-Hepc)免疫試劑盒
貝雷絲孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒
球孢白僵菌19號染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒
總狀毛霉19號染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
沼澤紅假單胞菌19號染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
葡萄穗霉屬Stachybotrys│sp. 質量規格:>98%,BRB連接蛋白試劑盒橙花
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BRB活化因子受體試劑盒長梗秦艽
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BRB活化因子試劑盒常山乙
DNA甲基化抑制劑史氏芽孢桿 2,5-二苯肼鹽酸鹽磷酸化鈣調依賴性蛋白激2Elisa
Erwinia persicina 2-溴苯肼鹽酸鹽紅生成受體Elisa
頭狀莖點霉 5-氨基-2-甲輕脂酞輔脫氫Elisa
金針菇 Dichlorobis(2-(二苯基膦)乙)釕(II)ATP合成Elisa
頂黑毛殼 4-溴-2,3-二甲核因子κB抑制物激Elisa
出芽短梗霉(黑酵母) 花生酸舒緩激肽Elisa
大豆慢生根瘤 花生酸痢疾密螺旋體Elisa
釀酒酵母 2,凝血原Elisa
檸檬兩面神 5-氟-2-缺氧誘導因子Elisa
米根霉 高哌唾液淀粉α1Elisa
枯草芽孢桿 10-溴癸酸IIA分泌型磷脂A2Elisa
健康皮張抗原(兔皮A) 2,4,6-三氟異酸苯酯煙酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
*鎖擲酵母 3-氟-4-(甲氧基羰基)苯酸20-羥化二十碳四烯酸Elisa
釀酒酵母 2-溴-5-(三氟甲基)吡啶糖原合成激3Elisa
陰溝腸桿 4-氨基肉桂酸乙酯巨噬來源的趨化因子22Elisa