商品介紹:
AXL1717是一種有效的胰島素樣生長(zhǎng)因子1型受體(IGF-1R)抑制劑,IC50值為1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):477-47-4 別名:Picropodophyllotoxin;Picropodophyllin;PPP 純度:99.58% 分子量:414.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:IGF-1R抑制劑(AXL1717)
英文名稱:AXL1717
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蘇云金芽胞桿菌印第安那亞種鈣粘蛋白21抗體Anti-APRT Antibody胞外超氧化物歧化(SOD3)
解脂亞羅酵母鈣粘蛋白β12抗體Anti-AQP10 Antibody胞漿型磷脂A2-α(cPLA2-α)
脆泊氏孔菌磷化磷脂酰肌激調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體Anti-APRT Antibody胞漿型磷脂A2(cPLA2)
大腸埃希氏菌甲狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體Anti-AQP1 Antibody胞漿免疫球蛋白(CIg)
粉紅擲孢酵母蛋白酪磷-1B抗體Anti-AQP1 Antibody(PB0498)伴侶蛋白10(CPN10)
短乳桿菌*Cyclin A1相互作用蛋白抗體Anti-AQP11 Antibody半乳糖凝集7(Gal-7)
芳香鐮孢野生型P53誘導(dǎo)基因1單克抗體Anti-AQP3 Antibody半乳糖凝集3(Galectin3)
清酒假絲酵母多囊腎蛋白1抗體Anti-AQP2 Antibody(PB0499)半乳糖(Galactose)
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○7多囊腎蛋白2抗體Anti-AQP3 Antibody半胱酰白三烯(CysLTs)
Marisediminicola凋亡相關(guān)蛋白4抗體Anti-AQP2 Antibody半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
硬結(jié)節(jié)桿菌磷脂酰肌激催化亞單位D抗體Anti-AQP4 Antibody板層相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)
栗疫菌血小板源性生長(zhǎng)因子受體β樣蛋白抗體Anti-AQP5 Antibody瘢痕性天皰瘡抗體(CP)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化磷酯Cβ3抗體Anti-AQP4 Antibody白血病抑制因子受體(LIFR)
肉色香蘑磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體Anti-AQP4 Antibody(PB0500)白血病抑制因子(LIF)
黑曲霉變種6磷果糖激2抗體Anti-AQP5 Antibody白酯(LE)
釀酒酵母磷化6磷果糖激2抗體Anti-AQP6 Antibody白調(diào)節(jié)(LR)
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
#盤長(zhǎng)孢狀刺盤孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IGF-1R抑制劑(AXL1717)釀酒酵母 3-(芐基氨基)酸乙酯淀粉Elisa
植物乳桿 土霉麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基胃蛋白Elisa
黑根霉 馬鈴薯液體培養(yǎng)基(含霉)纖維Elisa
小孢擬盤多毛孢 含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒核因子κB抑制蛋白αElisa
肉桂色曲霉 4-溴-2-氟苯甲激動(dòng)異構(gòu);分裂MBElisa
伏克盾殼霉 RV沙門增液體培養(yǎng)基(中國(guó)藥典)ATPElisa
芽殖酵母 硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基肌紅蛋白Elisa
冷溫木拉克酵母 改良察氏液體培養(yǎng)基促胰液Elisa
污水德沃斯氏 4-氟-3-三氟膽囊收縮Elisa
聚生殼 2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑抑胃肽Elisa
地衣芽孢桿 2-甲基-2-噻唑啉胃動(dòng)Elisa
香菇 3,4-二甲氧基肉桂酸凝血因子XIIaElisa
厚環(huán)乳牛肝 4-乙酰氧基凝血因子XIaElisa
橄欖色毛殼 N,N'-二甲基-9,9'-聯(lián)吖啶鎓硝酸鹽CD41aElisa
果生鏈核盤 TB培養(yǎng)基間粘附分子4Elisa