產(chǎn)品名稱:NAD蘋果酸酶(NADME)紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
分類:輔酶Ⅱ系列
貨號:GOY-01S6360
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測定意義 ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 測定原理: NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計的實(shí)驗(yàn)方案,1小時即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計/酶標(biāo)儀(比色測定波長為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
鼻咽癌(NPC)試劑盒橙皮苷1,2,3-三苯 91%3,5-二叔丁溴苯 99%
鼻咽癌(NPC)試劑盒橙皮苷查爾1,2,3-三苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品O-[(乙氧羰)]-N,N,N',N'-四硫尿四氟鹽 98%
膀胱癌抗原(UBC)試劑盒當(dāng)藥寧(+)-δ-酚 90%1-乙-(3-二氨)碳二亞鹽鹽 98.5%
膀胱癌抗原(UBC)試劑盒丁香酚(+)-δ-酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-乙氧-1-乙氧碳酰-1,2-二氫喹啉 99%
廣譜角蛋白(P-CK)試劑盒黃連3-巰-1,2- Matrix for FAB-MS and liquid SIMS, ≥98.5%2-氟-1,3-二化咪唑翁六氟磷酯 97%
廣譜角蛋白(P-CK)試劑盒蓮心磷三酯 99%乙脒 99%
癌因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl 試劑盒麥冬高黃A托布津 分析標(biāo)準(zhǔn)品四氟代脲六氟磷酯 98%
癌因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl 試劑盒麥冬黃烷B碲 98%9-芴-N-琥珀酰亞碳酯 98%
膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒小檗硫代嗎啉 98%芴氧羰酰 98%
膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒辛弗林鹽鹽綠草定 分析標(biāo)準(zhǔn)品芴氧羰酰 99%
中期因子(MK)試劑盒異茜草素2-乙酰檸檬三乙酯 99%4-(羥)苯氧乙 98%
中期因子(MK)試劑盒異茜草素-1-三(三硅)硅烷 90%苯并三氮唑-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯 99%
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒原薯蕷皂苷溴化 99%1-羥-苯并-三氮唑(無水) 99%
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒正壬 99.99%(劇品)3-羥-1,2,3-苯并三-4(3H)- 98%
B淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒氧醉椒素水質(zhì)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯 99%
B淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒假荊芥屬苷(+)-γ-維E 96%1-羥-7-偶氮苯并三氮唑 99%
NAD蘋果酸酶(NADME)紫外分光光度法大鼠反三腺原氨(rT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-苯 銻 CP,99.0%鄰苯二二烯酯 98.0%
大鼠組織轉(zhuǎn)谷氨酰(TGM2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-苯 銻 ACS, ≥99%叔十二硫 98%
大鼠11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-苯 銻 USP, 99.0-103.0%二乙二一己 96%
大鼠超氧化物歧化1(SOD1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒十二烷苯磺硫氫 99.99% metals basis2-乙-1,3-己二 98%
大鼠線粒體超氧化物歧化2(SOD2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒十二烷苯磺硫氫 99.995% metals basis2-乙-1,3-己二 分析標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胞外超氧化物歧化3(SOD3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒香葉高 AR,99.8%乙二叔丁 99%
大鼠銅伴侶超氧化物歧化4(SOD4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒香葉高 CP,99%正庚 AR,98.0%
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒香葉高 ACS,99.8-100.3%1,6-己二 CP,98.0%
大鼠血管緊張素I(ANG I)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 醋己定高 99.98% metals basis1,6-己二 AR,99.0%
大鼠血管緊張素II(ANG II)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 醋己定無水碳 AR,99%1,6-己二 99.5%
大鼠抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒L-半乳糖-1,4-內(nèi)酯無水碳 99.995% metals basis正庚 97%
大鼠β-黑色素激素(βMSH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L-半乳糖-1,4-內(nèi)酯鐵 AR, ≥99.5%異辛烷 for HPLC,>99% (GC)
大鼠早老素1(PS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 L-半乳糖-1,4-內(nèi)酯鐵 99.95% metals basis異丁苯 99%
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AgRP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒阿德福韋酯草 一水合物 AR,99.8%異丁苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)
大鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽38(PACAP-38)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 阿德福韋酯草 一水合物 CP,99.5%異丁苯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
大鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽27(PACAP-27)環(huán)化激活肽27(PACAP-27)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒阿德福韋酯草 一水合物 ACS, 99.5-101.0%異丁酐 98%
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。