商品介紹:
英文名稱:PD0325901 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg PD0325901是一種具有選擇性的的,ATP非競爭性的MEK抑制劑,IC50值為0.33nM,是CI-1040對ERK1和ERK2磷酸化作用的500多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:391210-10-9 別名:PD325901 純度:99.95% 分子量:482.19 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MEK抑制劑(PD0325901)
英文名稱:PD0325901
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
杏鮑菇磷化p21蛋白抗體Human IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)免疫試劑盒
肺形側(cè)耳磷化p21蛋白抗體Human IL-19(Interleukin 19) ELISA Kit人去乙酰化Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌8號染色體開放閱讀框84抗體Human IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit人去乙酰化Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化p21蛋白抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Human HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫試劑盒
小紅酵母CLEC2D蛋白抗體Human HSP-70(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體Human HSPβ6/HSP-20(Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit人去乙?;囸I激(dGHRL)免疫試劑盒
球形節(jié)桿菌醌氧化還原樣蛋白1抗體Human HSPG(Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)抗體免疫試劑盒
米曲霉銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human HYOU1(Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒
山羊葡萄球菌濃縮2復(fù)合亞基D3抗體Human IFABP/FABP2(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit人去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母磷化分裂周期蛋白6抗體Human IL-35(Interleukin 35) ELISA Kit人趨化因子受體3(CCR3)免疫試劑盒
泡盛曲霉磷化周期依賴激2抗體Human IFN-α(Interferon Alpha) ELISA Kit人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試劑盒
薄層菌碳酐12抗體Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit人趨化因子26(CCL26)免疫試劑盒
釀酒酵母泛載體蛋白R2抗體Human IgA1(Immunoglobulin A1) ELISA Kit人趨化因子2(CXCL2)免疫試劑盒
粘附分子3抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人趨化因子(FK)免疫試劑盒
仙芝(靈芝屬之一種)整合相關(guān)蛋白CD47Human INSL5(Insulin Like Protein 5) ELISA Kit人驅(qū)動蛋白家族成員27(KIF27)免疫試劑盒
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCC1q/TNF相關(guān)蛋白3試劑盒對氧基
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRB因子試劑盒丁香油
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質(zhì)量規(guī)格:BSB受體相關(guān)蛋白31試劑盒橙皮油內(nèi)酯
MEK抑制劑(PD0325901)木耳(雪白林) 苯酸新戊烷乙二酯Bcl-2相關(guān)死亡促進(jìn)因子Elisa
膠凍樣芽胞桿 3-聯(lián)苯酸磷酸化Bcl-2相關(guān)死亡促進(jìn)因子Elisa
解脂亞羅酵母 4-聯(lián)苯酸葡萄糖Elisa
具黃曲霉 叔丁氧羰基-D-天冬氨酸 4-芐酯維生B3Elisa
解脂亞羅酵母 2-羥基-5-氟吡啶犬尿酸Elisa
擬康寧木霉 5-氟-2-甲氧基吡啶喹啉酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移Elisa
細(xì)鏈格孢 八甘維生B5Elisa
蘇云金芽孢桿莫里遜亞種 3,6-二噠-4-甲酸BCA蛋白Elisa
發(fā)酵畢赤酵母 4-芐基-4-羥基唾液酸Elisa
反硝化鹽單胞 Boc-Lys(Z)-pNA鈣調(diào)磷酸Elisa
雙孢蘑菇 1-Boc-L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸Slingshot同源物Elisa
金針菇(毛柄、冬菇)) 6-溴喹喔啉鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激Elisa
蘋果*(可換成cfcc 7946) (1,5-環(huán)辛二烯)二化釕(II)鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激1DElisa
矩圓黑盤孢 (1,5-環(huán)辛二烯)化釕, 聚合物鈣調(diào)依賴蛋白激IIElisa
米曲霉 2-羥基丁酸鈉單絲氨酸蛋白激1Elisa