產(chǎn)品名稱:線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)微量法
規(guī)格:100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
分類:三羧酸循環(huán)系列
貨號(hào):GOY-01S6579
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測(cè)定意義 ICDHm(EC 1.1.1.41)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,在三羧酸循中催化異檸檬酸生成α-酮戊二酸,同時(shí)將NAD+ 還原為NADH,是三羧酸循環(huán)的限速酶之一,其催化的反應(yīng)是細(xì)胞NADH主要來(lái)源之一。 測(cè)定原理 ICDHm催化NAD+ 還原生成NADH,導(dǎo)致340nm處光吸收上升。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺(tái)式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒 離心管 黑色化鑭,七水 99.9% metals basis3-吲哚丁 98%
小鼠環(huán)孢素A(CsA)試劑盒離心管 綠色結(jié)晶化鋰 SP激動(dòng)素 植物培養(yǎng)級(jí), ≥99.0% (HPLC)
小鼠環(huán)孢素A(CsA)試劑盒離心管 棕色鉛 flakes,SP 激動(dòng)素 99%
小鼠對(duì)氨苯(PABA)試劑盒精液離心管二氧化錳 SP1-萘乙 96%
小鼠對(duì)氨苯(PABA)試劑盒尖底離心管二氧化錳 99.99% metals basis誘蟲(chóng)烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒圓底插口離心管硫鎂,七水 SP誘蟲(chóng)烯 93%
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒圓底離心管硫鎂,七水 99.99% metals basis反-玉米素 98%
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)試劑盒圓底羅口離心管硫錳,一水 SP玉米素核苷 97%
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)試劑盒圓底插口離心管硫錳,一水 99.99% metals basis霉素B 80%,750 μg/mg
小鼠T活化連接蛋白(LAT)試劑盒離心管 管套式碳鎂 SP鹽倍他司汀 99%
小鼠T活化連接蛋白(LAT)試劑盒高速離心管式碳鎂 99.99% metals basis硫博來(lái)霉素 1.5-2.0 units/mg
小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒羅口離心管 平底白蓋硫鎳,七水 SP赫斯特?zé)晒馊剂希?3258 98%
小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒羅口離心管 平底藍(lán)蓋鈮粉 99.95% metals basis,325目3,4-二氧 98%
小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒離心瓶鈮粉 99.5%,200目鹽阿霉素 98%
小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒離心瓶硝鎳,六水 99.99% metals basis多烯紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 離心瓶硝鎳,六水 SPD-(+)-麥芽糖一水合物 ≥98.0% (HPLC)
線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)微量法猴蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化鉺(III) 六水合物平菇(科大雜優(yōu))拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
猴前列腺素E合2(PTGES2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三化鐵(III) 六水合物釀酒酵母拉丁屬名: Rhizobium borbori
猴趨化因子CCL4樣蛋白1(CCL4L1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化銥(III)污泥根瘤菌拉丁屬名: anatipestifer
猴二肽肽VI (DPP6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化釔(III) 六水合物鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: Aspergillus niger
猴抗神經(jīng)元核抗體1型(ANNA1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化釔(III) 六水合物黑曲霉拉丁屬名: Rhizopus sp.
猴黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 四化銥(IV) 水合物根霉屬拉丁屬名: Risungbinella pyongyangensis
猴中性粒彈性蛋白(NE/ELA2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 四化銥(IV) 水合物Risungbinella拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
猴超氧化物歧化1(SOD1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒亞鈀枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Alternaria Alternata
猴絲氨蛋白12(PRSS12)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒亞鈀鏈格孢拉丁屬名: Mucor griseo
猴破骨激因子1 (OSF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝鈷,六水灰藍(lán)毛霉拉丁屬名: Pseudomonas graminis
猴蛋白激抑制劑γ(PKIγ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝鈷,六水草假單胞菌拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
猴甘露糖凝集素受體(MBLR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硫鈷,七水異常漢遜酵母異常變種拉丁屬名: Aspergillus flavipes
猴血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(PDGFRL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硫鈷,七水黃柄曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴B活化因子 (BAFF/CD257/TNFSF13B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氟化鎳毛殼(菌)科注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氟化鎳腫紅皮孔菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
猴載脂蛋白A1(ApoA1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 磷氫二鈉,二水釀酒酵母拉丁屬名: Helicostylum piriforme