以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Chk1抑制劑 | LY2606368 dihydrochloride | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
LY2606368 dihydrochloride是一種有效的,選擇性的,ATP競爭性的Chk1抑制劑,Ki值為0.9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1234015-54-3 別名:LY-2606368 dihydrochloride;Prexasertib dihydrochloride 純度:99.74% 分子量:438.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)賴缺陷型蛋白激1抗體Anti-MMP10 Antibody橋連整合因子2(BIN2)
迂回殼囊孢菌磷化WEE1蛋白抗體Anti-MMP10 Antibody橋連整合因子1(BIN1)
米黃絲膜菌Wnt信號抑制因子1抗體Anti-MMP12 Antibody橋粒芯糖蛋白4(DSG4)
慢生根瘤菌結締組織生長因子樣蛋白抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯糖蛋白3(DSG3)
北里胞菌原癌基因wnt7a蛋白抗體Anti-MMP12 Antibody橋粒芯糖蛋白1(DSG1)
摩加夫芽胞桿菌信號通路WNT10A抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白3(DSC3)
枯草芽孢桿菌信號通路Wnt5a抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白2(DSC2)
小孢根霉須狀變種p21調控蛋白WISP39抗體Anti-MMP13 Antibody橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)
紫蓋蜜環菌野生型P53誘導基因1抗體Anti-MMP14 Antibody橋粒聯結蛋白(AHNAK)
貴州綠僵菌心肌缺血預處理正調節蛋白2抗體Anti-MMP15 Antibody橋粒斑蛋白(DSP)
粘蓋牛肝菌*Wolfram綜合征蛋白1抗體Anti-MMP14 Antibody羥酰水解(HAGH)
雞傷寒沙門氏菌磷化賴缺陷型蛋白激1抗體Anti-MMP16 Antibody羥氧化2(HAO2)
大腸埃希氏菌WNK4抗體Anti-MMP16 Antibody羥氧化1(HAO1)
柿盤多毛孢包含氧化還原的WW域抗體Anti-MMP2 Antibody羥甲基戊二酰合(HMGCS)
Albidiferax色豐富蛋白抗體Anti-MMP2 Antibody羥甲基膽合(HMBS)
南方鹽單胞菌X射線修復交叉互補蛋白抗體Anti-MMP20 Antibody羥基異構(HYI)
細胞骨架相關蛋白抗體腸沙門氏菌腸亞種波那雷恩血清型人胃MatchPair™:胃壁細胞和胃腫瘤原代細胞
血清學定義結腸抗原1抗體左旋乳芽孢桿菌人胰腺MatchPair™:胰腺上皮細胞和腫瘤原代細胞
結腸抗原8抗體亮桿菌屬人直腸MatchPair™:直腸上皮細胞和直腸腫瘤原代細胞
結腸抗原10抗體鏈霉菌屬人子宮頸胞MatchPair™:宮頸上皮細胞和腫瘤原代細胞
Chk1抑制劑釀酒酵母 2,6-二氟乳酸Elisa
薄狀枝頂孢 1,2,4-三氮唑葡萄糖Elisa
木耳 1-氨基海因鹽酸鹽胰脂肪Elisa
楊樹口蘑 鄰苯二甲酸二異癸酯胰淀粉Elisa
秦氏蜜環 二十三酸超氧陰離子Elisa
纖細芽孢桿屬 2,4,6-三氮酚酪氨酸羥化Elisa
釀酒酵母 苊烯環磷酸鳥苷Elisa
匿名曲霉 2-溴聯苯環磷酸腺苷Elisa
枯草芽孢桿 9,10-二苯基蒽11-酮基睪酮Elisa
白僵 磺吡啶Elisa
阿魏側耳(阿魏菇) 磺醋酰維生B3Elisa
斯達氏油脂酵母 哌(六水)5羥色Elisa
曲霉 4-(叔辛基)兒茶酚Elisa
芽孢桿 4,4-二氨基二苯硫腎上腺Elisa
普拉特鏈霉 五苯硫酚維生B5Elisa