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P53 ELISA Kit 大鼠P53

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

異型德克酵母信號通路Wnt6抗體Anti-MFAP5 Antibody驅動蛋白家族成員18A(KIF18A)

鐮孢霉WD重復膜蛋白61抗體Anti-METTL3 Antibody驅動蛋白家族成員14(KIF14)

肉座菌屬Wnt1信號通路蛋白3抗體Anti-MFN1 Antibody驅動蛋白2(KNS2)

樟疫霉濕疹血小板減少伴免疫缺陷綜合征相關蛋白抗體Anti-MFGE8 Antibody巰基硫轉移(MPST)

弗雷德里克斯堡假單胞菌WDR68蛋白抗體Anti-MGA Antibody氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)

谷棒桿菌WDR91蛋白抗體Anti-MFN2 Antibody輕肽鐵蛋白(FTL)

阮繼生氏圣格奧爾根菌P53應答基因蛋白5抗體Anti-MGMT Antibody輕肽神經絲蛋白(NEFL)

喜海水鹽單胞菌WD重復膜蛋白19抗體Anti-mGluR1/GRM1 Antibody親尾蛋白(AFTPH)

門多薩假單胞菌磷化WEE1蛋白抗體Anti-MGMT Antibody親環D(CYPD)

庫爾勒鹽單胞菌糖類應答元件結合蛋白ChREBP抗體Anti-MGP Antibody(PB1003)親環B(CYPB)

粘質沙雷氏菌腎母瘤蛋白抗體Anti-MICA Antibody親環A(CYPA)

成團泛菌信號通路Wnt16抗體Anti-MGST1 Antibody親核β(KPNβ)

栗疫菌WDR23蛋白抗體Anti-MID1 Antibody親核α7(KPNα7)

釀酒酵母端粒卡哈爾體蛋白抗體Anti-MIB1 Antibody親核α6(KPNα6)

香菇信號通路WNT10B抗體Anti-MICB Antibody親核α5(KPNα5)

ATCC 14028EBV核蛋白2抗體Anti-MIF Antibody親核α4(KPNα4)

促黃體激誘導蛋白抗體白地霉（斜面）人源腫瘤細胞

S腺苷L-同型半胱水解抗體嗜熱毀絲霉人肺MatchPair™:肺上皮細胞和腫瘤原代細胞

離子轉運相關蛋白SLC7A9抗體假中間葡萄球菌人結腸MatchPair™:結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞

乙酰轉運蛋白1抗體鮑氏志賀氏菌人腦MatchPair™:小腦顆粒細胞和腫瘤原代細胞
smoothened抑制劑(PF-04449913)暗產色鏈霉 磷酸二氫縮Elisa

短波單胞 對稱二苯硫脲氨肽NElisa

黃海克錫勒氏 烯基硫脲乳酸脫氫Elisa

枯草芽孢桿 伍德合金肌酸酐Elisa

釀酒酵母 第威德合金谷氨酸氨基轉移Elisa

釀酒酵母 銀deta6去飽和Elisa

產堿假單胞 硅酸鋁deta5去飽和Elisa

芬萊氏鏈霉 磷酸鋁deta9去飽和Elisa

靈芝屬 活性氧化鋁7-乙氧基異吩惡唑酮脫乙基Elisa

大腸桿 活性氧化鋁S-腺苷甲硫氨酸Elisa

傷寒沙門氏 乙酸銅s腺苷同型半胱氨酸Elisa

康寧木霉 氧化亞銅糜蛋白Elisa

枯草芽孢桿 化銅類固Elisa

仙臺鏈霉 氫氧化銅17羥孕酮Elisa

釀酒酵母 溴化銅促黃體生成Elisa