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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
英文名稱：Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
產品規格：20T
發貨周期：1～3天
商品介紹：
Caspase 3，即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3，也稱CPP32、Yama或apopain，屬于Caspase家族的CED-3亞家族(CED-3 subfamily)，系一種在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶，也是哺乳動物細胞中研究多的一個Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9，且可以直接特異性剪切多種Caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。這些由Caspase 3介導的蛋白剪切是細胞凋亡分子機制的重要組成部分。另外，caspase 3在細胞核凋亡和細胞起泡(Cell blebbing)過程中也起到了關鍵作用，包括染色質固縮(chromatin condensention)，DNA片段化(DNA fragmentation)等。 Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款簡單快速檢測細胞或組織內Casepase 3活性的試劑盒，其檢測原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline)，pNA在405nm附近有強吸收，從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 3的活性（黃色產物與Caspase 3酶的活性成正比）。 另外，本試劑盒中還提供了Caspase 3催化產生的黃色產物pNA，以此作為定量caspase 3酶活性的標準品。 試劑盒組份： Lysis Buffer裂解液————8ml Assay Buffer檢測緩沖液——8ml Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl pNA(10mM)————————200μl 儲存條件：-20℃ |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
溶血卵磷脂?；D移3(LPCAT3)英文名稱：LPCAT3 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因6抗體包裝25g
溶血卵磷脂?；D移2(LPCAT2)英文名稱：LPCAT2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框2抗體包裝25mg
溶血卵磷脂酰基轉移1(LPCAT1)英文名稱：LPCAT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框86抗體包裝25G
溶血磷脂受體3(LPAR3)英文名稱：LPAR3 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框128抗體包裝5G
溶體性磷2(ACP2)英文名稱：ACP2 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框62抗體包裝100g
妊娠關聯血漿蛋白A(PAPPA)英文名稱：PAPPA ELISA KitCCZ1蛋白抗體包裝500g
熱休克轉錄因子4(HSF4)英文名稱：HSF4 ELISA Kit腦蛋白5抗體包裝1g
熱休克轉錄因子1(HSF1)英文名稱：HSF1 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g
熱休克蛋白β8(HSPβ8)英文名稱：HSPβ8 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框43抗體包裝1g
熱休克蛋白β6(HSPβ6)英文名稱：HSPβ6 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
熱休克蛋白β2(HSPβ2)英文名稱：HSPβ2 ELISA Kit幾丁質3樣蛋白3抗體包裝100ml
熱休克蛋白40(HSP40)英文名稱：HSP40 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝500ml
染色質裝配因子1亞基B(CHAF1B)英文名稱：CHAF1B ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2亞型1抗體包裝1g
染色質域解旋DNA結合蛋白4(CHD4)英文名稱：CHD4 ELISA Kit18號染色體開放閱讀框1抗體包裝5g
染色框同源物3(CBX3)英文名稱：CBX3 ELISA Kit色c氧化VIIA亞型2抗體包裝100g
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格：> 95%,BR主要組織相容性復合體，II類，DQα2試劑盒知母皂苷E;Anemarsaponin
蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質量規格：HPLC>95%,標準品周期依賴性激5試劑盒知母皂苷元;Sarsasapogenin
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質量規格：純度> 98%,BR，可用于培養周期依賴性激4試劑盒醉椒;Kavain
Caspase 3活性檢測試劑盒(比色法)假交替單胞 2-異基乙酰乙酸乙酯血清腫瘤相關物質Elisa
豬瘟病 2,3,5-三氟溴苯血清總補體Elisa
擬青霉 2-氨基異乙酯血栓海綿蛋白Elisa
蘇云金芽胞桿肯尼亞亞種 2-氨基煙乙酯血栓前體蛋白Elisa
四川散斑殼 N-(芐氧羰基)-1H-吡唑-1-甲脒血栓A2Elisa
柱狀田頭菇 乙酸異辛酯血栓B2Elisa
耐冷冷桿 乙酸異丁酯血栓調節蛋白Elisa
栗疫 2,4,6-基-3-環己烯-1-甲；異環檸檬血糖Elisa
梨葉殼小圓孢 氯代單丁基錫酸血纖蛋白原降解產物Elisa
熱帶假絲酵母 2，4-二氯-3，5-二酚血纖維蛋白溶原Elisa
節桿 N-BOC-1H-吡唑-1-甲脒血小板VASP;P2Y12Elisa
Pseudarthrobacter 3,4,5-氧基苯乙血小板第三因子Elisa
微桿 3-甲基硫代酸已酯血小板第四因子Elisa
釀酒酵母 普施安藍 MX-R血小板反應蛋白;凝血敏感蛋白1Elisa
深藍鐮孢 3--2-甲酸血小板反應蛋白4Elisa
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