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細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)

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更新時間:2022-04-24 10:17:33瀏覽次數:234

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 4×50ml
貨號 GOY-01X10002 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)公司*的產品:ChRM2/FITC 熒光標記蕈型酰膽受體M2抗體 IgG代二苯膦 97%
ChRM3/FITC 熒光標記蕈型酰膽受體M3抗體IgG苯二酯 98%
CIB1/FITC 熒光標記鈣-整合結合蛋白1抗體IgG4,4'-二氨二苯酮 98%
CIDE-B/FITC 熒光標記促進凋亡因抗體IgG三苯化膦 98%
CIDEB/FITC 熒光標記C

詳細介紹

產品屬性:

中文名稱:細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)

英文名稱:

產品規格:4×50ml

發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研

商品介紹:

用途:

細胞色素氧化酶染色

注意事項:

主要由Co孵育液、Lugol碘液、硫代硫酸鈉溶液、鈷鹽溶液、陰性對照等組成,染色后酶活性部位呈棕綠色。

儲存條件:4℃,避光,6個月

細胞生物學研究有以下幾個方面:

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調控;

⑤細胞分化及其調控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

芥子(標準品)英文名稱: Neostigmine bromideLRRC59蛋白抗體包裝25g

芥子堿英文名稱: MagnolinLRRC41蛋白抗體包裝500g

芥子堿硫鹽(標準品)英文名稱: Racanisodamine促黃體生成受體抗體包裝100ml

金合歡;槐(標準品)英文名稱: Sulfadimethoxine sodium salt乳清蛋白α抗體包裝25ml

金蓮花(標準品)英文名稱: Sulfadimethoxine sodium salt核纖層蛋白B2抗體包裝500ml

金毛耳草(黃毛耳草)(標準品)英文名稱: Digitoxigenin層粘蛋白α5抗體包裝1g

金錢草(標準品)英文名稱: CorynoxineL-瓜抗體包裝250mg

金蕎麥(標準品)英文名稱: Urapidil泌乳升高蛋白1抗體包裝25g

金雀花堿,野靛堿(標準品)英文名稱: Fusidate Sodium溶體相關膜蛋白4α抗體包裝5g

金石蠶苷(標準品)英文名稱: Fusidate Sodium分化相關基因14抗體包裝1g

金絲桃苷(標準品)英文名稱: 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrateβ內酰樣蛋白2抗體包裝5g

金絲桃(標準品)英文名稱: Flucloxacillin sodium神經突觸粘附樣分子4抗體包裝1g

金松雙黃(標準品)英文名稱: Parishin A可溶性半乳糖凝集3結合蛋白抗體包裝5g

金鐵鎖(標準品)英文名稱: Maslinic acid瘦抗體包裝25g

金銀花(標準品)英文名稱: 2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid磷脂磷酯LPIN1抗體包裝5g

: 3007資源名稱: 山夫登堡沙門氏菌 質量規格:>98.5%,BR抗鞘磷脂抗體試劑盒番瀉苷C;Sennoside C

紫產色鏈霉菌Streptomyces│violochromogenes 質量規格:HPLC≥99%,標準品抗鞘磷脂抗體試劑盒附子靈;Fuziline

季也蒙假絲酵母果生變種Candida│guilliermondii var. carpophila 質量規格:>99.5%,AR抗鞘磷脂抗體試劑盒飛蓬酯乙;Erigoster B
細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)赭鱗蘑菇 2,6-二氟甲苯草酰乙酸Elisa

產氣腸桿 2-氟溶Elisa

簇生黃韌傘 胡椒NAD-蘋果酸Elisa

粉紅單端孢 4-羥基-3-甲氧基苯甲賴氨酰氧化2Elisa

灰樹花 5-氨基四氮唑賴氨酰氧化3Elisa

大腸埃希氏桿 2,4,6-三乙酸脂肪氧化3Elisa

華麗側耳(佛羅里達側耳) 3-氨基芐巨病Elisa

蘑菇 3-羥基-4-甲氧基苯甲嘌呤核苷磷酸化Elisa

紅冬孢酵母 2-溴甲基-1,3-二氧戊環甘氨酸Elisa

 寇氏隱甲藻 1,1-環己基二乙酸絡合合成Elisa

三葉草根瘤 5-羥基-L-色氨酸β-呋喃果糖苷Elisa

大腸埃希氏 3-溴-1-甲基-1,2,4-噻唑α-蛋白Elisa

靈芝 3-氟肉桂β-蛋白Elisa

腸膜明串珠 3-氯肉桂角鯊烯合成Elisa

假單胞 對甲基肉桂香葉基香葉基焦磷酸合Elisa 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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