商品介紹:
Robin-1是一種有效的,可逆的特異性真核核糖體生物合成抑制劑,GI50為136±7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):328023-11-6 別名:Ribozinoindole-1 純度:98.0% 分子式:C??H??N?S 分子量:256.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
真核核糖體生物合成抑制劑(Rbin-1) | Rbin-1 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
香菇吲哚乙/植物生長(zhǎng)單克抗體Human PYCR2 ELISA Kit原鈣黏1(PCDH1)ELISA Kit
山綠豆根瘤菌白介4受體抗體IL-4RαHuman PTGES3(Prostaglandin E synthase 3) ELISA Kit魚(yú)精蛋白1(PRM1)ELISA Kit
Algoriphagus白介2受體γ鏈抗體Human QKI ELISA Kit誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)ELISA Kit
深綠色木霉白介1受體1抗體Human QPRT(Quinolinate phosphoribosyltransferase) ELISA Kit誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)ELISA Kit
淺黃隱球酵母白介1受體2抗體Human PURA ELISA Kit有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)ELISA Kit
微球菌白介20受體α鏈抗體Human PUS1 ELISA Kit游離脂肪(FFA)ELISA Kit
化膿性鏈球菌白介20受體β鏈抗體Human PVRIG ELISA Kit游離原卟啉(FEP)ELISA Kit
康寧木霉吲哚乙抗體/植物生長(zhǎng)抗體Human PUS3 ELISA Kit游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA Kit
枝芽胞桿菌整合α6抗體Human PTPRR ELISA Kit游離狀腺原(Free-T3)ELISA Kit
大球蓋菇擬南芥IKI3抗體Human PVRL3/Nectin 3 ELISA Kit游離肉堿(Free Carnitine)ELISA Kit
米曲霉白介5抗體Human PTPRS ELISA Kit游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit
松口蘑白介-1受體相關(guān)激1抗體Human PURA ELISA Kit游離甲狀腺(FT4)ELISA Kit
巴斯德畢赤酵母整合α5抗體Integrin α5Human PUS1 ELISA Kit游離睪(F-TESTO)ELISA Kit
平滑假絲酵母整合β1/Integrin β1抗體Human PUS3 ELISA Kit游離蛋白S(FP-S)ELISA Kit
糙皮側(cè)耳整合αVβ3抗體Human PTPRZ1(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase zeta) ELISA Kit游離雌三(FE3)ELISA Kit
孢籃狀菌胰島樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體Human PVRIG ELISA Kit游離β絨毛膜促性腺激(f-βhCG)ELISA Kit
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)哈巴苷
麥克姆多類(lèi)芽孢八疊球菌Paenisporosarcina│macmurdoensis 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記哈巴俄苷
吉林?jǐn)S孢酵母Sporobolomyces│jilinensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記香蒲新苷
真核核糖體生物合成抑制劑(Rbin-1)CR1/CD35 Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)草鍶 5N,99.999%
CD36/PAS-4 CD36抗體四硫磺鈉,二水 98%
CD4 CD4抗體硫-5-羥色肌酐 98%
CD7 CD7抗體(-)-鹽東莨菪 ≥99.0%
CD8 CD8抗體(-)-鹽東莨菪 99.0%
CD9/MRP-1 CD9蛋白抗體糖精鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD40L CD40L抗體環(huán)草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體2,4,5-涕 分析標(biāo)準(zhǔn)品