詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:Smoothened激活劑
英文名稱:Purmorphamine
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Purmorphamine是一種Smoothened的激活劑,氟硼二-環巴胺與Smo結合,IC50值約為1.5μM;同時能夠誘導成骨細胞分化,EC50值為1μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:483367-10-8 純度:98.47% 分子式:C??H??N?O? 分子量:520.62 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌枯草亞種神經上皮酪激/癌激10抗體Human MEK3 ELISA Kit免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA Kit
人葡萄球菌MHC I類鏈相關蛋白A/組織相容性復合物MHCIa抗體Human MEF2A ELISA Kit免疫球蛋白E Fc段受體Ⅰ(FcεRⅠ)ELISA Kit
冰川金色單胞菌中腦核仁蛋白抗體Human MEIS3 ELISA Kit免疫球蛋白D(IgD)ELISA Kit
褐紅小孔菌巨噬移動抑制因子抗體Human MED8 ELISA Kit免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit
紅細菌屬巨噬炎癥因子1α抗體 MIP-1αHuman MUC5B(Mucin-5B) ELISA Kit免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit
Corynebacterium variabile蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體Human MEKK2 ELISA Kit免疫核糖核(Irna)ELISA Kit
南海雷*氏菌髓鞘相關糖蛋白a/b抗體Human MEK3 ELISA Kit免疫反應性生長激(irGH)ELISA Kit
熱橄欖鏈霉菌褐色變種絲裂原活化蛋白激激1抗體Human MEMO1 ELISA Kit糜蛋白(Chymase)ELISA Kit
副豬嗜血桿菌絲裂原活化蛋白激激2抗體Human MEK4 ELISA Kit錳超氧化物歧化(SOD2)ELISA Kit
四川散斑殼蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Human MEN1 ELISA Kit鎂依賴性磷1(MDP1)ELISA Kit
沙漠畢赤酵母髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體Human MEPCE ELISA Kit美洲商陸(PWM)ELISA Kit
灰色鏈霉菌黑色瘤相關抗原/黑色-A抗體Human ADH1A(Alcohol dehydrogenase 1A) ELISA Kit美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA Kit
點枝頂孢單核趨化蛋白1抗體Human MED12L ELISA Kit錨蛋白B(Ank-B)ELISA Kit
阿舒假囊酵母巨噬克激因子抗體Human MED15 ELISA Kit毛細血管擴張性共濟失調突變基因(ATM)ELISA Kit
朱紅叢赤殼雙微體2癌基因抗體Human MED17 ELISA Kit麥考酚(MPA)ELISA Kit
*蟲擬蠟菌絲蛋白抑制劑B7抗體Human MDM1 ELISA Kit麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA Kit
高麗菌屬菌種Kribbella│sp. 質量規格:0.99原花青
蕈狀芽孢桿菌Bacillus│mycoides 質量規格:>98%,BR柚皮
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格:HPLC≥98%,標準品柚皮苷
Smoothened激活劑phospho-MEK1 (Thr286) 化絲裂原活化蛋白激激1抗體壬 98%
Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體1-辛 99%
Phospho-MEK1/2 (Ser221) 化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體1-辛 97%
phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 化絲裂原活化蛋白激1/2抗體正辛 ≥98%, FG
phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 化絲裂原活化蛋白激1抗體1-辛 ≥92%, FCC
ERK1/2(p44/42 MAPK) 絲裂原活化蛋白激1/2抗體1-辛 natural, ≥92%, FCC
phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) 化絲裂原活化蛋白激1/2抗體丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 化絲裂原活化蛋白激1/2抗體丁酯 99%