商品介紹:
LDK378 2Hcl是ALK抑制劑,IC50為0.2nM,比對(duì)IGF-1R和InsR的抑制性高40倍和35倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1380575-43-8 別名:Ceritinib dihydrochloride 純度:99.86% 分子量:631.06 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ALK抑制劑(LDK378 2Hcl)
英文名稱:LDK378 dihydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
少孢哈薩克斯坦酵母Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TREX2 Antibody多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)
洋蔥伯克霍爾德氏菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIB2 Antibody(PB0946)多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)
黑木耳Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM28 Antibody(PB0848)多萜磷-N-乙酰基葡萄糖磷轉(zhuǎn)移1(DPAGT1)
橘黃裸傘Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM24 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移9(GALNT9)
小白菇PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM25 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移8(GALNT8)
啤酒酵母PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM21 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移7(GALNT7)
雜色曲霉堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM33 Antibody(PB0874)多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移6(GALNT6)
灰葡萄孢(灰霉病菌)膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM5 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移5(GALNT5)
嗜熱鏈球菌FITC標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIO Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移4(GALNT4)
Deinococcus羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRIM6 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移3(GALNT3)
產(chǎn)黃青霉PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPA1/TSA Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移2(GALNT2)
魯氏接合酵母Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPC3 Antibody多肽-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移14(GALNT14)
蘋果鏈格孢Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPC3 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移13(GALNT13)
大腸埃希菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPC4 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移12(GALNT12)
草青霉Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPC4 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移11(GALNT11)
反硝化鹽單胞菌PE標(biāo)記的兔抗馬IgGAnti-TRPC5 Antibody多肽-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移10(GALNT10)
蛋白激Aγ抗體菩提奇異球菌人體腎癌組織源提取物
蛋白激受體相關(guān)1β抗體拜氏梭菌人體膽道癌組織提取物
過氧化活化增生受體γ2抗體干燥棒桿菌人體卵巢癌組織提取物
乳腺癌抑制基因Protor1抗體屎腸球菌(屎鏈球菌)小鼠大隱靜脈組織提取物
ALK抑制劑(LDK378 2Hcl)解脂亞羅酵母 葫蘆A
紅蜜籃狀 去氧脫水穿心蓮內(nèi)酯
釀酒酵母 對(duì)羥基苯乙
朱紅栓* 脫水穿心蓮內(nèi)酯
冷海水黃桿 10-姜酚
毛柄(金針菇) 延胡索甲
產(chǎn)黃青霉 低聚果糖
蘇云金芽孢桿 D-綿子糖
澳大利亞平臍蠕孢 錦葵色
油田四合球 芍藥
委內(nèi)瑞拉鏈霉 矮牽牛色
溶酪葡萄球 飛燕草色
Bacillus methylotrophicus 千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷
枯草芽孢桿 醋酸地塞米松
假單胞屬 氨力農(nóng)