詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PF-562271 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
PF-562271是有效的ATP競爭性的可逆FAK和Pyk2激酶抑制劑,IC50分別為1.5和13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:717907-75-0 純度:99.36% 分子量:507.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
樺剝管孔菌羅丹明標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF3 Antibody二-N-乙酰殼二糖(CTBS)
海馬齒平臍蠕孢FITC標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF5 Antibody耳椎蛋白90(OC90)
異常威克漢姆酵母堿性磷(AP)標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF6 Antibody耳纖維源性蛋白(OTOR)
類阿達青霉膠體金標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAM1 Antibody耳蝸蛋白(OTOS)
粘質沙雷氏菌Alexa Fluor 647標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF7 Antibody耳石蛋白1(OTOL1)
苜蓿中華根瘤菌生物標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAM2 Antibody耳錨蛋白(OTOA)
毛云芝辣根過氧化物標記的兔抗豚鼠IgMAnti-Transketolase/TKT Antibody耳膠蛋白(OTOG)
艾阿華諾卡氏菌Cy3標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TREM1 Antibody耳畸蛋白(OTOF)
乳酒假絲酵母Cy5標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TREM1 Antibody耳蝶呤3(OTOP3)
蜜蜂生球擬酵母APC標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TREM1 Antibody耳蝶呤2(OTOP2)
漏斗棱孔菌Alexa Fluor 350標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TREM1 Antibody耳蝶呤1(O)
枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 488標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAP1 Antibody兒茶酚-O-甲基轉移(COMT)
食品檢測用O157:H7大腸埃希氏菌Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgMAnti-TREM1 Antibody鱷失調蛋白(ATCAY)
泡盛曲霉辣根過氧化物標記的兔抗馬IgGAnti-TREM1 Antibody腭/肺/鼻上皮癌關聯蛋白(PLUNC)
盾殼霉生物標記的兔抗馬IgGAnti-TREML1 Antibody惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)
糖多孢菌(可訂)APC標記的兔抗馬IgGAnti-TREX1 Antibody多藥耐藥關聯蛋白1(MRP1)
蛋白磷2C抗體德氏乳桿菌乳亞種(萊氏曼氏乳桿菌)人體肺癌組織提取物
脫氫激亞型2抗體斯氏李斯特氏菌人體乳腺癌組織源組織提取物
環指蛋白3抗體乳乳球菌乳亞種人體甲狀腺癌組織源組織提取物
蛋白激A受體2α亞基抗體Chryseobacteriumjeonii人體膀胱癌組織源細胞
可逆FAK和Pyk2激酶抑制劑(PF-562271)粗柄羊肚 羥基丹參酮IIA
嗜冷海桿 3alpha-羥基丹參酮IIA
假諾卡氏 25(S)-羥基原人參三
釀酒酵母 25(R)-羥基原人參二
蒼白桿屬 3-羥基亞甲基丹參醌
茄鏈格孢 2alpha-羥基澤蘭內酯
動物雙歧桿 石杉堿
彩色豆馬勃 豆腐果新苷B
多粘類芽胞桿 豆腐果新苷A
江西諾卡氏 銀杏酸C15:0
愛媛類芽孢桿 鹽酸
蒼白鹽八疊球 1,2-二氫丹參醌
枯草芽孢桿 丹參新醌D
雜色曲霉 丹參新醌C
白僵 丹參新醌B