詳細介紹
商品介紹:
用途: 細胞和組織的酸性磷酸酶染色 注意事項: 主要由萘酚、六氮化對品紅、亞等組成,染色后酶活性部位呈紅色。 儲存條件:-20℃,避光,6個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
3×10ml|3×20ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
雞矢藤(標準品)英文名稱: Monensin sodium salt富含亮重復蛋白6抗體包裝1g
雞血藤(標準品)英文名稱: Monensin sodium salt低密度脂蛋白受體相關蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7)包裝25g
雞眼睛(標準品)英文名稱: Hippuric acid磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝5g
積雪草(標準品)英文名稱: Avicularin低密度脂蛋白受體抗體包裝100g
積雪草苷B英文名稱: Pimobendan瘦抗體包裝25g
積雪草苷(標準品)英文名稱: 2-Amino-4'-fluorobenzophenone 腫瘤自身抗原LMO4抗體包裝500g
積雪草(標準品)英文名稱: 2-amino-4'-chlorobenzophenone 淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝1g
吉馬(標準品)英文名稱: Protostemonine白免疫球蛋白樣受體8抗體包裝25g
吉祥草(標準品)英文名稱: Bullatine A白三烯B4受體1抗體包裝5g
急性子(標準品)英文名稱: ophiopogonin D'白免疫球蛋白樣受體6抗體包裝1g
蒺藜(標準品)英文名稱: BendrofluMethiazide淋巴活化基因-3抗體包裝5g
蒺藜皂苷D英文名稱: Plumbagin白相關免疫球蛋白樣受體1抗體包裝1g
蒺藜皂苷K英文名稱: Lapachol 白分化抗原CD207抗體包裝5g
己可可堿(標準品)英文名稱: Armillarisin A白三烯B4受體2抗體包裝25g
加蘭他敏(標準品)英文名稱: 17α-Hydroxypregnenolone白相關免疫球蛋白樣受體2抗體包裝5g
干酪乳桿菌干酪亞種Lactobacillus│casei subsp.casei 質量規格:>99%,BR抗神經膠質纖維性蛋白試劑盒非洲防己堿;Columbamine
米根霉Rhizopus│oryzae 質量規格:≥97.0%,BR抗殺菌通透性增高蛋白抗體試劑盒佛司可林;Forskolin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:HPLC≥99.0%,標準品抗腮腺管抗體試劑盒伏格列波糖;Voglibose
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯法)蘇云金芽孢桿 4-氨基二苯硫酸鹽甘薯病CElisa
弗吉尼亞鏈霉 10-甲氧基亞氨基芪D-果糖Elisa
擬莖點霉屬 4-溴苯乙抗肽Elisa
橙色嗜熱子囊 苯頻哪凝集Elisa
鍺栓孔 環己烷羧酸甲酯酚氧化Elisa
米曲霉 1-溴-3,5-二氟苯過氧化氫Elisa
戊糖片球 2-氟-4-甲基吡啶超氧化物歧化Elisa
單增李斯特氏 DL-肉堿酚氧化Elisa
枯草芽孢桿 對氟苯乙抗壞血酸Elisa
果生鏈核盤 對氟苯乙酰氯磷酸烯式酮酸Elisa
美澳型核果褐腐病 3-氟芐腺嘌呤核苷三磷酸Elisa
凝結芽胞桿 3-氟芐氯蛋白磷酸2AElisa
短小芽孢桿 3-氟芐氯膨脹Elisa
草色串孢 3-氟芐溴多聚組氨酸標簽Elisa
多座蟲草* 4-嘧啶酮δ-氨基-γ-酮戊酸Elisa