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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：AnnexinV-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒
英文名稱：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產品規格：20T
發貨周期：1～3天
商品介紹：
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒是用熒光素APC標記的Annexin V作為探針，來檢測細胞早期凋亡的發生，可用流式細胞儀或其他熒光檢測設備進行檢測。 其檢測原理為：在正常的活細胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細胞膜的內側，但在早期凋亡的細胞中，PS從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中。Annexin-V（膜聯蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力結合。可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。 另外，本試劑盒中提供的7-AAD可用來區分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞。7-AAD是一種核酸染料，同PI有著相似的熒光特性，但其發射光譜較PI窄，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的佳替代品，可與Annexin V聯合使用。該染料不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜，但可穿透晚期凋亡細胞或者壞死細胞并與其內的DNA結合。因此將Annexin V-APC與7-AAD聯合使用時，7-AAD則被排除在活細胞（Annexin V-/7-AAD-）和早期凋亡細胞（Annexin V+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被Annexin V-APC和7-AAD結合染色呈現雙陽性（Annexin V+/7-AAD+）。 試劑盒組份： 重組人Annexin V/APC*（rh Annexin V/APC）———100μl 7-AAD Viability Staining Solution——————100μl 1×Binding buffer——————————————10ml 儲存條件：4℃，有效期一年。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)英文名稱：BRCA2 ELISA Kit分裂周期樣激2抗體包裝25g
乳鐵傳遞蛋白(LTF)英文名稱：LTF ELISA Kit分裂周期樣激3抗體包裝5g
乳脫氫B(LDHB)英文名稱：LDHB ELISA Kit17號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
乳過氧化物(LPO)英文名稱：LPO ELISA Kit17號染色體開放閱讀框53抗體包裝25g
肉毒堿棕櫚酰基轉移1A(CPT1A)英文名稱：CPT1A ELISA Kit17號染色體開放閱讀框57抗體包裝5g
肉毒堿乙酰轉移(CRAT)英文名稱：CRAT ELISA Kit17號染色體開放閱讀框64抗體包裝1g
融合蛋白(FUS)英文名稱：FUS ELISA Kit17號染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg
溶質載體家族30成員7(SLC30A7)英文名稱：SLC30A7 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
溶質載體家族30成員6(SLC30A6)英文名稱：SLC30A6 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg
溶質載體家族30成員5(SLC30A5)英文名稱：SLC30A5 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
溶質載體家族30成員4(SLC30A4)英文名稱：SLC30A4 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框78抗體包裝1g
溶質載體家族30成員3(SLC30A3)英文名稱：SLC30A3 ELISA Kit維調節核基質相關蛋白抗體包裝5g
溶質載體家族30成員10(SLC30A10)英文名稱：SLC30A10 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
溶質載體家族30成員1(SLC30A1)英文名稱：SLC30A1 ELISA Kit17號染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg
溶血卵磷脂酰基轉移4(LPCAT4)英文名稱：LPCAT4 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g
猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質量規格：HPLC≥98%,標準品轉化生長因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格：945-1030 ug /mg,二物轉化生長因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格：效價測定轉谷酰2C多肽試劑盒知母皂苷B;Anemarsaponin
AnnexinV-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒多主葡萄殼 3-氯-2-甲氧基砒啶血紅蛋白晚期糖基化終末產物Elisa
枯草芽孢桿 5--2-甲氧基吡啶血紅結合蛋白Elisa
瓜亡革 5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶血紅氧合1Elisa
平菇 3-溴-2-甲氧基吡啶血漿α顆粒膜蛋白Elisa
木糖葡糖酸醋桿 鎢酸鈉血漿淀粉樣蛋白PElisa
釀酒酵母 2,6-二氯苯甲血漿抗凝蛋白CElisa
美澳型核果褐腐病 3-溴-2-羥基吡啶血漿抗凝蛋白SElisa
鼠傷寒沙門氏 2-羥基-5-溴吡啶血漿絲氨酸蛋白抑制劑Elisa
殼 溴化鋰水合物血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1Elisa
熱帶假絲酵母 3,5-二氟-4-異氧基血清白蛋白Elisa
枇杷假尾孢褐斑病 4-羥基-6,7-二甲氧基喹啉血清低半乳糖化IgA1Elisa
香菇 間氟苯磺酰血清淀粉樣蛋白AElisa
毛簇木霉 4-氨基-2-氟苯酚鹽酸鹽血清淀粉樣蛋白A1Elisa
解淀粉芽孢桿植物亞種 L-氨酸叔丁酯鹽酸鹽血清鐵Elisa
禽腺病 3,5-二水楊酸血清鐵蛋白Elisa
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