以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
細胞周期檢測試劑盒 |
| 20T|50T|100T | 1~3天 |
商品介紹:
細胞周期(cell cycle)是指細胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為止的活動過程,通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期組成。G1 期:細胞開始RNA和蛋白質(zhì)的合成,但DNA含量仍保持二倍體。S 期:DNA 開始合成,這時細胞核內(nèi)DNA的含量介于G1 期和G2 期之間。當(dāng)DNA 復(fù)制結(jié)束成為4倍體時,細胞進入G2 期。G2 期的細胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì),直到進入M 期。因此,單純從DNA含量無法區(qū)分G2 期和M 期。一旦有絲分裂發(fā)生,細胞分裂成兩個細胞,這兩個細胞或者進入下一個細胞周期,或者進入靜止期(G0期),而G0 期從DNA含量上同樣無法與G1 期區(qū)分。因此,整個復(fù)制周期可以描述為G0/G1、S、G2/M 期。通過核酸染料PI標(biāo)記DNA,并由流式細胞儀進行分析,可以得到細胞各個時期的分布狀態(tài),計算出G0/G1%、S%、G2/M%,了解增殖能力,在腫瘤病理學(xué)研究中,通常以S 期細胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標(biāo)。 PI 為插入性核酸熒光染料,能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA 雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合,其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系,用流式細胞儀進行分析,就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態(tài),從而計算出各個期的百分含量。PI染色后,假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M 期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA 復(fù)制的S 期細胞的熒光強度為1-2 之間。 細胞周期檢測試劑盒是利用細胞內(nèi)DNA 能夠和熒光染料結(jié)合的特性,細胞各個時期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同,流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣來檢測細胞周期。 儲存條件:-20℃避光保存。 有效期:一年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
布林佐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Axitinib胱抗體包裝5g
布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azaperone胰凝乳蛋白B抗體包裝1g
布美他尼;丁氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azasetron HCl補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體包裝5g
草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azelastine base 分化促進因子77抗體包裝25g
草依地普侖/草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bacitracin Zinc 半胱蛋白抑制劑樣蛋白1抗體包裝5g
茶海明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benazepril HydrochlorideCTBS蛋白抗體包裝25g
蟾它靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benazepril Hydrochloride硫軟骨β1/β-1,4-GalNAc-T抗體包裝5g
蟾酥;華蟾酥基;華蟾精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bezafibrate硫軟骨聚合3抗體包裝25g
長春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bezafibrate胎盤催乳1/2抗體包裝5g
長春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Blonanserin酪激C-SRC抗體包裝25g
長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brivudine磷化酪激C-SRC抗體包裝5g
朝藿定B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brivudine酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體包裝1g
赤蘚紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cabazitaxel半胱延伸蛋白α抗體包裝1g
醋己鋅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitoxantrone磺基轉(zhuǎn)移CSPS抗體包裝100g
醋谷/乙酰谷酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lamotrigine富含半胱蛋白2抗體包裝25g
猴頭菇99Hericium erinaceus 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)血管緊張1-7試劑盒胸腺五肽;Thymopentin
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管活性腸肽試劑盒細辛脂;(-)-asarinin
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR血管動蛋白試劑盒仙鶴草酚B;agrimol B
細胞周期檢測試劑盒類干酪乳桿 Alvelestat腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Elisa
新瀉氨基桿 Enalaprilat Dihydrate蛋白激CεElisa
蠟狀芽孢桿 Bitopertin谷轉(zhuǎn)氨Elisa
NCI-H1563(人胚肺) AT7519琥珀酸;丁二酸Elisa
公牛鏈霉 Canagliflozin病性出血病病抗體Elisa
釀酒酵母 R406 (free base)連環(huán)蛋白βElisa
島生異擔(dān)子 Ostarine蓋他病抗體Elisa
抑制暗棕色桿 Nafamostat Mesylate可溶性補體激活產(chǎn)物SC5b9Elisa
Sphingomonas Moexipril HCl賴氫酸吡啶啉Elisa
根瘤 2-甲氧基-6-羧酸甲酯吡水痘帶狀皰疹病IgG抗體Elisa
灰平鏈霉 2,4,5,6-四氟間苯二甲核仁磷酸蛋白Elisa
貝萊斯芽胞桿 Ozagrel鋅原卟啉Elisa
腸膜明串珠 4-溴-2,6-二酚金屬硫蛋白Elisa
Microbacterium flavum 2-甲基肉桂酸相關(guān)蛋白A-IgG抗體Elisa
食砜節(jié)桿 異啉鹽酸鹽H7N9Elisa