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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488) | 20T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒應用范圍廣，可用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。 細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。 TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 488）可以用來檢測組織細胞在凋亡晚期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入Alexa Fluor 488-12-dUTP，從而可以用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。 Alexa Fluor 488染料穩定性更高，信號更強，從而使標記物更亮，抗淬滅能力更強。 試劑盒組份： 5×Equilibration Buffer ——————————750μl Alexa Fluor 488-12-dUTP Labeling Mix————100 μl Recombinant TdT Enzyme ——————————20 μl Proteinase K(2 mg/ml)——————————— 40 μl DNase I (1 U/μl)————————————— 5μl 10×DNase I Buffer with MgCl2—————— 100 μl 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
神經營養因子3(NT3)英文名稱：NT3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64B抗體包裝100g
神經型一氧化氮合(NOS1)英文名稱：NOS1 ELISA Kit組蛋白H3-K9基轉移抗體包裝25g
神經纖維網蛋白1(NRP1)英文名稱：NRP1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員6抗體包裝5g
神經纖維2(NF2)英文名稱：NF2 ELISA Kitcornichon樣蛋白抗體包裝100g
神經調節4(NRG4)英文名稱：NRG4 ELISA KitRas激抑制因子連接增強蛋白1抗體包裝25g
神經調節1(NRG1)英文名稱：NRG1 ELISA KitRas激抑制因子連接增強蛋白2抗體包裝500g
神經肽Y受體Y5(NPY5R)英文名稱：NPY5R ELISA KitRas激抑制因子連接增強蛋白3抗體包裝1g
神經肽Y受體Y2(NPY2R)英文名稱：NPY2R ELISA Kit分裂周期2樣蛋白激5抗體包裝250mg
神經肽Y受體Y1(NPY1R)英文名稱：NPY1R ELISA KitCD20樣蛋白抗體（造血干4跨膜蛋白3）包裝10MG
神經肽S(NPS)英文名稱：NPS ELISA Kit周期蛋白依賴性激CABLES1抗體包裝25g
神經肽FF(NPFF)英文名稱：NPFF ELISA Kit分裂周期相關蛋白3抗體包裝5g
神經絲蛋白3(NEF3)英文名稱：NEF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白148抗體包裝5mg
神經介S(NMS)英文名稱：NMS ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白153抗體包裝1ml
神經介B(NMB)英文名稱：NMB ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白160抗體包裝100mg
神經激肽B(NKB)英文名稱：NKB ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白22抗體包裝25mg
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格：>98.5%,BR,可用于培養轉化生長因子β受體3試劑盒澤瀉 B;Alisol B
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：HPLC>98%,標準品轉化生長因子β受體2試劑盒澤瀉 A;Alisol A
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格：> 98%,進分,Sigma A2385轉化生長因子β受體1試劑盒正丁; Butylamine
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 488)康寧木霉 硫代醋酸S-甲酯血管緊張ⅠElisa
分枝節桿 丁鹽酸鹽血管緊張ⅡElisa
蠟狀芽孢桿 2-(4-溴-3-氟苯基)-5-丁基-1,3-二惡烷血管緊張Ⅱ受體1Elisa
大腸埃希 4-苯基-1-丁基溴血管緊張Ⅱ受體1抗體Elisa
大腸埃希氏(大腸桿) 噻托溴銨血管緊張Ⅱ受體2抗體Elisa
游動微 異喹啉-N-氧化物血管緊張原Elisa
暹羅盤孢 9-芴酮腙血管緊張轉化Elisa
產朊假絲酵母 4-丁氧基-2,3-二氟苯酚血管緊張轉化2Elisa
費希爾曲霉 內向-9-甲基-9-氮雜雙環[3，3，1]壬烷-3-鹽酸鹽血管內皮超化因子Elisa
成鏈需鹽桿 硫酸鈷銨六水合物血管內皮鈣粘蛋白Elisa
pACYC184 2-溴-4'-苯基乙酰苯血管內皮生長因子AElisa
黃桿 2,6-二氯-N-苯基苯血管內皮生長因子BElisa
四川散斑殼 4,6-二甲氧基-2-甲基嘧啶血管內皮生長因子CElisa
繩索狀芽胞桿 3-羥基-2'-甲基-2-萘苯血管內皮蛋白C受體Elisa
膠孢 2-羥基-7-萘磺酸鈉血管內皮生長因子Elisa
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