詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 細胞學樣本常規染色,尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。 注意事項: 巴氏染色液的一種主要成分,主要由亮綠、磷鎢酸等組成。OG6與EA36聯合使用,可以將細胞漿染成鮮明的綠色、藍色、粉色。 儲存條件:室溫,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
土荊皮乙(標準品)英文名稱: 2'-Deoxyguanosine monohydrate透明質合成3抗體包裝250mg
土壟大白蟻巢(標準品)英文名稱: 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白56抗體包裝1g
土木香(標準品)英文名稱: 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體包裝5g
土木香內酯(標準品)英文名稱: 2'-Deoxyadenosine monohydrate熱休克蛋白相關蛋白4抗體包裝100g
土牛膝(標準品)英文名稱: DNA, Fishsperm透明質合成2抗體包裝25g
兔耳草(標準品)英文名稱: DNA from salmon sperm 同源盒基因HOXA3蛋白抗體包裝5g
菟絲子(南方菟絲)(標準品)英文名稱: 5-Fluoro-2'-deoxycytidine同源盒基因HOXA4蛋白抗體包裝1g
蛻皮激(標準品)英文名稱: 5-Fluoro-2'--deoxyuridine同源盒基因HOXA6蛋白抗體包裝25g
脫落(標準品)英文名稱: Guanosine同源盒基因HOXA7蛋白抗體包裝5g
脫氫齒孔英文名稱: Guanosine羥基類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體包裝1g
脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿(標準品)英文名稱: GDP Disodium Salt血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體包裝100g
脫穿心蓮內酯(標準品)英文名稱: SU-11274血紅結合蛋白1抗體包裝25g
脫穿心蓮內酯琥珀半酯(標準品)英文名稱: Uridine血紅蛋白α抗體包裝500g
脫羊藿(標準品)英文名稱: Uridine結合球蛋白β抗體包裝100g
脫氧熊果苷(標準品)英文名稱: UTP, Trisodium Salt海馬豐富基因轉錄蛋白1抗體包裝25g
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規格:HPLC>98%,標準品免疫球蛋白重鏈可變區試劑盒遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X
三隔鐮刀菌Gibberella│tricincta El-Gholl McRitchie Schoult. & Ridings 質量規格:>99%免疫球蛋白重鏈試劑盒硫辛;Lipoic acid
鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質量規格:HPLC>99%,標準品免疫球蛋白輕鏈lambda試劑盒羅丹明B;Rhodamine B
EA36染色液德爾布有孢酵母 2,5-二氟腸激Elisa
葡萄座腔 對甲苯異硫酸酯氧化低密度脂蛋白-β2 GPⅠElisa
乳酸乳球乳亞種 4-硫脲αL艾杜糖苷酸Elisa
根瘤 2,5-二氯-2,5-二甲基己烷膜聯蛋白-A5Elisa
鏈霉 4-(叔丁氧基羰基)苯酸庚型肝炎病IgM抗體Elisa
灰肉鏈霉 N,N'-二苯甲脒α-胡蘿卜Elisa
廢鹽田枝芽孢桿 2-氯-1,4-苯二硫酸鹽γ-酚Elisa
紅平菇(農) 4-異基磺酰基苯酸δ-酚Elisa
肺炎克雷伯氏肺炎亞種 2,2-二乙氧基乙纖溶Elisa
煙薰鏈霉 氯乙縮二乙N-乙酰神經氨酸Elisa
葡萄酒有孢漢遜酵母 4-溴吡啶-2-甲末端脫氧核糖核酸轉移Elisa
斑玉蕈 3-氨基苯酸鹽酸鹽腺苷酸激Elisa
溜曲霉 5-乙酰基尿嘧啶血管抑制2Elisa
厚垣鐮孢 苯磺酸異酯后期表達增強T-活化抗原Elisa
灰紅鏈霉 2,3-二氯硫代苯甲酰葡萄糖轉運蛋白10Elisa