詳細介紹
商品介紹:
PHA-848125是一種有效的CDK和Tropomyosin receptor kinase(TRK)雙重抑制劑,對cyclin A/CDK2,cyclin H/CDK7,cyclin D1/CDK4,cyclin E/CDK2,cyclin B/CDK1和TRKA的IC50值分別為45,150,160,363,398和53nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:802539-81-7 別名:Milciclib 純度:98.61% 分子量:460.57 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PHA-848125 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
釀酒酵母周期蛋白SG2N抗體Anti-GAA Antibody心肌型蘭尼定受體2(RYR2)
考克氏菌STRN4蛋白抗體Anti-GAB1 Antibody心肌(MYOCD)
鉤狀木霉鈉離子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗體Anti-GABRA1 Antibody心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)
平滑假絲酵母電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗體Anti-GABBR1 Antibody心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)
乳白耙菌神經元電壓門控鈉通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗體Anti-GAD1 Antibody心肌肌動蛋白α1(ACTC1)
金頂側耳紅膜蛋白STOM抗體Anti-GABRB3 Antibody心肌鈣黏蛋白(CDHH)
短小芽孢桿菌鈉依賴性脯轉運PROT抗體Anti-GAD1 Antibody斜方蛋白1(RHOM1)
釀酒酵母基轉運蛋白2抗體Anti-GAD2 Antibody小異二聚體伴侶(SHP)
紫丁香蘑溶質載體蛋白家族35成員C2抗體Anti-GAD2 Antibody小亞基鈣蛋白1(CAPNS1)
中國臺灣根霉轉綠激活蛋白SRCAP抗體Anti-GADD45A Antibody小蛋白γ(PARVγ)
放射形根瘤菌上皮特異性ETs轉錄因子抗體Anti-GAD2 Antibody小蛋白β(PARVβ)
污黑腐皮殼纖溶原激活物抑制因子2/血漿原激活抑制因子-2抗體Anti-GADD45A Antibody小蛋白α(PARVα)
華麗側耳 (佛羅里達側耳)SLFNL1抗體Anti-GADD45G Antibody小腦肽4(CBLN4)
鏈球菌(不定種)SCN2A抗體Anti-Galactosidase alpha/Gla Antibody小腦肽3(CBLN3)
側耳SEL1L抗體Anti-GAL Antibody小腦肽2(CBLN2)
巴博乳桿菌SCN1A抗體Anti-Galectin 2/LGALS2 Antibody小腦肽1(CBLN1)
鈉碘轉運體蛋白8抗體膠質芽胞桿菌人椎間盤髓核細胞
組蛋白甲基轉移SMYD4抗體煙草節桿菌人滑膜細胞
絲/蘇蛋白激38抗體毛頭鬼傘(雞腿菇)人骨骼肌衛星細胞
分選連接蛋白1抗體離褶傘(松毛菇)人肺大靜脈平滑肌細胞
CDK/TRK抑制劑(PHA-848125)金針菇(毛柄、冬菇) 三氟磺酸鈧纖維Elisa
克魯斯假絲酵母 糠基硫中性蛋白Elisa
魚肉 總孔雀石綠、結晶紫 N-(9-芴甲氧羰基)-N1-叔丁氧羰基-L-色氨酸磷脂A2Elisa
小孔屬 2--3-甲基噻吩胰島生長因子2Elisa
氧化黃色桿 四乙二二甲胰島樣生長因子結合蛋白3Elisa
蠟狀芽孢桿 二乙基二硫代氨酸鋅α半乳糖基抗原Elisa
繩狀籃狀 二已A型口蹄疫Elisa
巨孢毛霉 十二烷口蹄疫A型抗原Elisa
檸檬綠木霉 1-癸硫因子信號轉導抑制因子3Elisa
尖孢鐮孢 甲基烯酸月桂酯因子信號轉導抑制因子1Elisa
果生鏈核盤 乙酰酮錳(III)骨鈣Elisa
尖鐮孢 2-溴-3-甲基噻吩二氧化Elisa
大腸埃希氏桿 2-氟-4-硝苯球蛋白Elisa
鏈格孢 5-戊炔氨酸氨基轉移Elisa
靈芝 雙(三苯基膦)化鎳天門冬氨酸氨基轉移Elisa