詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Raf抑制劑(MLN 2480)
英文名稱:MLN 2480
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
MLN2480是一種具有選擇性的廣譜的Raf抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1096708-71-2 別名:BIIB-024 純度:98.41% 分子量:506.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鴨疫里氏桿菌堿性磷(AP)標記的兔抗牛IgMAnti-TLR8 Antibody非ATP蛋白體26S亞基10(PSMD10)
黑曲霉羅丹明標記的兔抗雞IgGAnti-TMEM240 Antibody紡錘體蛋白4(SPIN4)
嗜果膠黃桿菌膠體金標記的兔抗雞IgGAnti-TMEM199 Antibody紡錘體蛋白3(SPIN3)
簡青霉Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgGAnti-TMEM107 Antibody紡錘體蛋白2B(SPIN2B)
深海微桿菌堿性磷(AP)標記的兔抗雞IgGAnti-TMEM173 Antibody(PB0544)紡錘體蛋白2(SPIN2)
蘋果落葉交鏈孢霉生物標記的兔抗雞IgGAnti-Tmem255b Antibody紡錘體蛋白1(SPIN1)
出芽短梗霉Cy3標記的兔抗雞IgGAnti-TNC Antibody防御β2(DEFβ2)
MarinobacterCy5標記的兔抗雞IgGAnti-TMPRSS3 Antibody防御β136(DEFβ136)
呂氏泰勒蟲(崇信株)Cy5.5標記的兔抗雞IgGAnti-TNF Antibody防御β135(DEFβ135)
黑曲霉Cy7標記的兔抗雞IgGAnti-TNF alpha/Tnf Antibody防御β134(DEFβ134)
解淀粉芽孢桿菌PE標記的兔抗雞IgGAnti-TNF Antibody防御β133(DEFβ133)
小馬勃PE-Cy3標記的兔抗雞IgGAnti-TNF Antibody防御β132(DEFβ132)
燕麥鐮孢PE-CY5標記的兔抗雞IgGAnti-TNF Antibody防御β131(DEFβ131)
草青霉APC標記的兔抗雞IgGAnti-TNF Antibody防御β130(DEFβ130)
嗜熱鏈球菌PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgGAnti-TNFAIP1 Antibody防御β129(DEFβ129)
蘇云金芽孢桿菌PE-Cy7標記的兔抗雞IgGAnti-TNFAIP6 Antibody防御β128(DEFβ128)
環指蛋白131抗體嗜鹽四聯球菌人主動脈組織提取物
脫氫E1β亞單位抗體海蘇特氏菌人體肝癌組織源組織提取物
磷化β抗體海氏腸球菌人胃癌組織提取物
脫氫α1抗體Halobacillussp.人體食管癌組織提取物
Raf抑制劑(MLN 2480)加拿大畢赤酵母 化錦葵色-3-O-葡萄糖苷
棒狀美麗鹽 化錦葵色-3-O-半乳糖苷
少根根霉戴爾變種 化芍藥-3-O-阿拉伯糖苷
米曲霉 化芍藥-3-O-葡萄糖苷
澳大利亞平臍蠕孢 化芍藥-3-O-半乳糖苷
鏈霉 化矮牽牛-3-O-阿拉伯糖苷
塊* 化矮牽牛-3-O-葡萄糖苷
米曲霉 化矮牽牛-3-O-半乳糖苷
伯頓絲孢畢赤酵 化矢車菊-3-O-阿拉伯糖苷
螺狀 化飛燕草-3-O-阿拉伯糖苷
彎曲桿* 化飛燕草-3-O-葡萄糖苷
稻生擲孢酵母 化飛燕草-3-O-半乳糖苷
釀酒酵母 維采寧-1
山羊豆根瘤 紫丹參C
大豆慢生根瘤 異丹參酮II
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)