以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
TBK1和PDK1抑制劑(BX795) | BX795 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:BX795 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg BX795是一種有效的,選擇性的TBK1/PDK1雙重抑制劑,IC50值為2nM/6nM,對(duì)其選擇性是對(duì)PKA,PKC,c-Kit,GSK3β等的50多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):702675-74-9 純度:99.33% 分子量:591.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
芽孢桿菌屬谷受體2抗體Human UXT ELISA Kit大鼠組織因子與活化凝血因子7復(fù)合物免疫試劑盒
蒙氏假單胞菌谷受體3抗體Human VPS53 ELISA Kit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
玉龍小單孢菌谷受體4抗體Human VPS54 ELISA Kit大鼠組織因子(TF)前體 免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌促代謝型谷受體1抗體Human FLOT1(Flotillin-1) ELISA Kit大鼠組織因子(TF)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌甘受體α4抗體Human VPS72 ELISA Kit大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA) 免疫試劑盒
綠粘帚霉生長(zhǎng)分化因子8抗體Human VPS8 ELISA Kit大鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
哈茨木霉磷化糖原合激-3β抗體Human VSTM1(V-set and transmembrane domain-containing protein 1) ELISA Kit大鼠組織蛋白去乙酰化(HD)免疫試劑盒
滑菇Glu-Glu tag抗體Human VSTM2L ELISA Kit大鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
毛木耳胰高血糖樣肽-2抗體Human USP49 ELISA Kit大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
釀酒酵母甘受體alpha 1/2/3型抗體Human USP5 ELISA Kit大鼠組N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)免疫試劑盒
類阿達(dá)青霉抑制型G蛋白α3抗體Human USP50 ELISA Kit大鼠組(HIS)免疫試劑盒
根瘤菌促性腺激釋放激受體抗體Human USP53 ELISA Kit大鼠足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒
大腸埃希菌生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體Human USP9X ELISA Kit大鼠總膽汁(TBA)免疫試劑盒
皮落青霉GATA結(jié)合蛋白3抗體Human USP35 ELISA Kit大鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒
薄層菌粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human USP36 ELISA Kit大鼠自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒
拜耳結(jié)合酵母骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體Human USP37 ELISA Kit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger var. niger Tiegh. 質(zhì)量規(guī)格:0.99氧代川南亭堿
白黃鏈霉菌Streptomyces│alboflavus 質(zhì)量規(guī)格:0.97苔黑酚葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.98酚-7-O-葡萄糖苷
TBK1和PDK1抑制劑(BX795)長(zhǎng)枝木霉 N,N'-二-BOC-1H-1-胍基吡唑(Pyrazol(Boc)2)葡萄糖-6-磷酸Elisa
副短短芽孢桿 2--4-氟芐葡萄糖-6-磷酸Elisa
栗色渾圓鏈霉 水合高酸鐵脂肪酸合成Elisa
茶色銀耳 對(duì)二亞甲苯雙(化三苯基膦)瘤病16型L1抗體Elisa
靈芝 3-氟-4-苯乙酮病抗體Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 (-)-(1S,4R)-N-叔丁氧羰基-4-氨基環(huán)戊-2-烯-1-甲酸細(xì)小病Elisa
糞腸球 7,7,8,8-四基對(duì)苯二醌二病H5亞型抗體Elisa
炭黑曲霉 3,5-二叔丁苯高遷移率族蛋白B1Elisa
釀酒酵母 (R)-(+)-1-苯基乙促甲狀腺釋放Elisa
黑曲霉 3-甲基-4-羥基苯甲白介1αElisa
三葉草根瘤 二(乙酰酮)鉑(II)羧甲基賴氨酸Elisa
深紅酵母 無水氘代乙(Isotopic)卵磷脂Elisa
褐囊蜜環(huán) 4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑可溶性活化基因-3Elisa
秦氏蜜環(huán) N-芐氧羰基-L-纈氨酰基-L-酪氨酸甲酯N(ε)羧乙基賴氨酸Elisa
硬水黃桿 4-溴-2-(三氟甲基)苯甲蛋白激AElisa