詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
FMK | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
FMK是一種不可逆的RSK2抑制劑,能夠共價修飾RSK的C末端區域。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:821794-92-7 別名:RSK2 kinase inhibitor 純度:98.0% 分子量:342.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
印度洋新鞘菌Alexa Fluor 350標記的兔抗牛IgGAnti-TLR1 Antibody分揀連接蛋白13(SNX13)
粉褶側耳、粉紅側耳Alexa Fluor 488標記的兔抗牛IgGAnti-TLN2 Antibody分揀連接蛋白12(SNX12)
果生鏈核盤菌Alexa Fluor 555標記的兔抗牛IgGAnti-TLR1 Antibody分揀連接蛋白11(SNX11)
殼菌PE-Cy3標記的兔抗牛IgMAnti-TLR1 Antibody分揀連接蛋白10(SNX10)
琉球曲霉PE-CY5標記的兔抗牛IgMAnti-TLR10 Antibody分揀連接蛋白1(SNX1)
叢毛單胞菌APC標記的兔抗牛IgMAnti-TLR1 Antibody分揀蛋白1(SORT1)
展示接霉Alexa Fluor 350標記的兔抗牛IgMAnti-TLR2 Antibody分層蛋白(SFN)
解脂亞羅酵母Alexa Fluor 647標記的兔抗牛IgMAnti-TLR3 Antibody肺部激活調節趨化因子(PARC)
柿生假絲酵母Cy3標記的兔抗牛IgMAnti-TLR5 Antibody腓骨蛋白7(FBLN7)
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Cy5標記的兔抗牛IgMAnti-TLR4 Antibody肥胖抑制(OB)
木霉Cy5.5標記的兔抗牛IgMAnti-TLR5 Antibody(PB0472)肥大類糜蛋白1(CMA1)
美澳型核果褐腐病菌Cy7標記的兔抗牛IgMAnti-TLR7 Antibody鯡精激(DOLK)
酵母屬生物標記的兔抗牛IgMAnti-TLR7 Antibody(PB0473)非受體型蛋白酪磷6(PTPN6)
龜裂鏈霉菌龜裂亞種膠體金標記的兔抗牛IgMAnti-TLR8 Antibody非受體型蛋白酪磷1(PTPN1)
Lonsdalea quercina subsp. britannicaAlexa Fluor 488標記的兔抗牛IgMAnti-TLR9 Antibody非受體酪激2(TNK2)
土生類諾卡氏菌Alexa Fluor 555標記的兔抗牛IgMAnti-TMBIM1 Antibody非紅血影蛋白β4(SPTβN4)
肝糖原磷化抗體發酵纖維單胞菌人腹膜毛細血管組織提取物
肌肉糖原磷化抗體豇豆慢生根瘤菌人冠狀動脈組織提取物
早幼粒細胞白血病蛋白抗體鰒發光桿菌人臍動脈組織提取物
麻瘋病和帕金森氏病共同調節蛋白抗體斯氏梭菌人大隱靜脈組織提取物
RSK2抑制劑(FMK)細交鏈格孢(可訂購) 表兒茶3-O-(3''-O-甲基)沒食子酸酯
灰葡萄孢(灰霉病) 5-沒食子酰基奎寧酸
肉桂鏈霉 箭藿苷C
節桿 苦瓜 I
Pedobacter 牡荊-4''-O-葡萄糖苷
枯草芽胞桿 新夏佛托苷
松針散斑殼 葉下珠新
四草海桿狀 安納基林
泳池芽殖單胞 (+)-丁香樹脂酚
總狀毛霉 靈芝酸K
大腸埃希氏定量標準株 靈芝酸H
頂青霉 靈芝酸C2
新科木耳(平菇) 靈芝酸C1
漢氏鹽單胞 靈芝酸B
孟氏假單胞 化錦葵色-3-O-阿拉伯糖苷