p38MAP激酶抑制劑(PD 169316)公司*的產(chǎn)品：Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 人D二聚體 氧化鋁 99.998% metals basis ,5～6μm,粉末
human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 人免疫球蛋白E納米氧化鋁 99.9% metals basis,α相,30nm,親水型
Human Triggeri

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p38MAP激酶抑制劑(PD 169316)

英文名稱：PD 169316

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

巨型艾美耳球蟲(chóng)磷化Src原癌基因抗體Anti-FSCN1 Antibody信號(hào)淋巴激活分子家族成員7(SLAMF7)

高地芽孢桿菌STAC2蛋白抗體Anti-FSHB Antibody(PB0138)信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)

土曲霉轉(zhuǎn)錄因子SOX30抗體Anti-FSHR Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5B(STAT5B)

產(chǎn)堿假單胞菌13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體Anti-FST Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)

布雷正青霉線粒體相關(guān)富含半胱蛋白抗體Anti-FSHR Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)

美澳型核果褐腐病菌跨膜接頭蛋白SIT抗體Anti-FURIN Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)

黏結(jié)珊瑚狀放線菌SKAP55蛋白抗體Anti-FSTL3 Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)

栗疫菌沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白2抗體Anti-FUS Antibody信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)

木耳腫瘤/抗原11.2抗體Anti-FUT4 Antibody鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)

巨大芽孢桿菌平滑肌蛋白抗體Anti-FUT1 Antibody鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)

香菇SHROOM1蛋白抗體Anti-FUT3 Antibody心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)

土生叢毛單胞菌磷化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-FXYD1 Antibody(PB0740)心營(yíng)養(yǎng)樣因子1(CLCF1)

枯草芽孢桿菌SCK蛋白抗體Anti-FZD1 Antibody心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3)

米根霉磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-FZD3 Antibody心磷脂酰基轉(zhuǎn)移1(LCLAT1)

異酒香酵母精結(jié)合蛋白2抗體Anti-FZD4 Antibody心磷脂合(CLS)

蠟狀芽孢桿菌唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集1抗體Anti-G6PD Antibody心肌營(yíng)養(yǎng)1(CT1)

Sestrin3抗體費(fèi)氏桿菌謝氏亞種HK-2人腎皮質(zhì)曲小管上皮細(xì)胞

癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體大腸埃希氏桿菌原代細(xì)胞

組蛋白連接作用蛋白抗體螢光假單胞菌人成骨細(xì)胞

線粒體乙酰化3抗體潮濕纖維單孢菌人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞
p38MAP激酶抑制劑(PD 169316)Pectobacterium cypripedii  3,9-二(1, 1-二甲基-2-羥基乙基)-2,4,8,10-氧代螺旋[5.5]十一烷O型口蹄疫合成肽結(jié)構(gòu)蛋白抗體Elisa

孟氏假單胞 4-吡啶甲酰白介3Elisa

哈茨木霉 3-甲基吡唑旋毛蟲(chóng)抗體Elisa

畢赤酵母 2-吡啶甲酰肼磷脂A2Elisa

產(chǎn)氨短桿 2-氨基咪唑硫酸鹽肺炎支原體Elisa

不動(dòng)桿 2-吡催產(chǎn)Elisa

雀斑蘑菇 乙酰脲骨骼肌肌球蛋白重鏈4Elisa

分枝節(jié)桿 L-甲硫氨酰甘氨酸傳染性胸膜肺炎抗體Elisa

ppic9 磺吡啶胰高血糖樣肽2Elisa

少根根霉 磺醋酰球蛋白DElisa

加利福尼亞鏈霉 4-甲氧基三苯甲基肺炎支原體抗體Elisa

矮小傘枝霉 帕潘立酮α2巨球蛋白Elisa

菠蘿泛 鄰苯二甲酰肼藍(lán)耳病抗原Elisa

凍土毛霉 3--4-氟苯酸O型口蹄疫抗原Elisa

林生毛霉 (1R,2R)-(-)-N-(對(duì)磺酰基)-1,2-二苯基乙二小反芻獸疫抗原Elisa