詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:H3K27me3demethylase抑制劑(GSK-J4)
英文名稱:GSK-J4
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:GSK-J4 產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg GSK-J4是一種有效的H3K27me3demethylase抑制劑,抑制KDM6B和KDM6A的活性,IC50值分別為8.6μM和6.6μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1373423-53-0 純度:98.48% 分子量:417.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
瓜類鞘單胞菌胃泌抑制肽受體抗體Human TRIM24 ELISA Kit大鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human TRIM2 ELISA Kit大鼠糖皮質類固受體(GR)免疫試劑盒
假單胞菌屬硫轉移pi基因抗體Human TRAT1 ELISA Kit大鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
米氏假單胞菌接頭蛋白Gab 2抗體Human TRAV20 ELISA Kit大鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌葡萄糖6磷α/G6Pase-α抗體Human TRIM23 ELISA Kit大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌糖磷脂酰肌抗體Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) ELISA Kit大鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
球孢鏈霉菌黃色變種乙二1抗體Human TRBV5-4 ELISA Kit大鼠碳酐2(CA-2)免疫試劑盒
棒曲霉核呼吸因子2抗體Human DCT(L-dopachrome tautomerase) ELISA Kit大鼠碳酐(CA)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌腫瘤轉移抑制基因GDIA1抗體Human TREML4 ELISA Kit大鼠胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
長雙歧桿菌腫瘤轉移抑制基因GDIA2抗體Human TRAP1 ELISA Kit大鼠羧甲基賴(CML)免疫試劑盒
普通層褶菌胰高血糖抗體Human TRAPA/SSR1 ELISA Kit大鼠羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
香菇線粒體甘油3磷酰基轉移抗體Human TRAT1 ELISA Kit大鼠髓樣觸發性受體2(TREM2)免疫試劑盒
橄欖色毛殼磷脂酰基蛋白聚糖-6抗體Human TRAV20 ELISA Kit大鼠髓系觸發受體-1(TREM-1)免疫試劑盒
抗性微桿菌磷二羥酰基轉移抗體Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) ELISA Kit大鼠髓鞘相關糖蛋白(MAG)免疫試劑盒
粉褶環柄菇囊性組織液體蛋白15抗體Human TRBV5-4 ELISA Kit大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化接頭蛋白Gab2抗體Human TRAP1 ELISA Kit大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
H3K27me3demethylase抑制劑(GSK-J4)大腸埃希氏(大腸桿) 硝酸釷過氧化物Elisa
腸沙門氏腸亞種 硝酸釷熱休克蛋白Elisa
植物乳桿 乳酸丁酯脂肪酸合成Elisa
芽孢桿 亞鉑酸銨脂肪酸合成Elisa
平菇 烷四絡合物蔗糖Elisa
異色擬盤多毛孢 六羰基鎢胃蛋白Elisa
巨大香菇 雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銅解Elisa
*櫻桃鏈格孢 乙二四乙酸鋅鈉鹽混合功能氧化Elisa
云南鞘氨單胞 二(乙酰酮)鈀(II)酪氨酸Elisa
熒光假單胞 乙酰酮鈷(II)過氧化物Elisa
產氣腸桿 乙酰酮亞鐵氧化型Elisa
球孢白僵 Dicarbonylacetylacetonato Iridium(i)還原型Elisa
葡萄座腔 氨基磺酸鈷蛋白Elisa
長隱球酵母 (S)-1-Boc-吡咯烷-3-甲酸羥自由基Elisa
大腸埃希 氘氧化鈉-d多酚氧化Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)