eIF4E與eIF4G的相互作用抑制劑(4E1RCat)公司*的產(chǎn)品：LTC4 ELISA Kit 大鼠白三烯C4紅四氮唑 98%
Cyt-C ELISA Kit 大鼠色C酰酮釩 97%
Ang- I ELISA Kit 大鼠血管緊張Ⅰ二酚橙四鈉鹽 AR
MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色抗體二二硫代氨鋅 98%
DPP IV ELISA Kit 大鼠二肽肽Ⅳ氟化鋅,四水

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：eIF4E與eIF4G的相互作用抑制劑(4E1RCat)

英文名稱(chēng)：4E1RCat

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

Brenneria salicis小鼠抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗體Anti-MAOA Antibody(PB0704)色羥化2(TPH2)

黃白馬杜拉放線菌粘著斑蛋白抗體Anti-MAP2 Antibody色羥化1(TPH1)

黑青霉嗜鉻顆粒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體Anti-MAOB Antibody(PB0705)三葉因子3(TFF3)

耶納農(nóng)球菌維生D結(jié)合蛋白抗體Anti-MAP1LC3A Antibody三葉因子2(TFF2)

總狀毛霉血管非炎癥分子1抗體Anti-MAP2K2 Antibody三葉因子1(TFF1)

金黃隱球酵母血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAP2K1 Antibody三肽基肽Ⅰ(TPP1)

楊爛皮殼蕉孢菌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C型抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷腺苷(ATP)

杰丁塞伯林德納氏酵母囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷肌(IP3)

蘇云金芽胞桿菌空泡分選蛋白18抗體Anti-MAP2K3 Antibody基鳥(niǎo)苷合1(TGS1)

炭疽芽胞桿菌磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody三合蛋白(TRDN)

蘇云金芽胞桿菌達(dá)爾可他亞種磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody軟骨粘附(CHAD)

沙雷氏菌屬鳥(niǎo)苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K7 Antibody軟骨糖蛋白39(GP39)

三葉草根瘤菌磷化鳥(niǎo)苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨凝集蛋白(CHODL)

栗疫病菌磷化鳥(niǎo)苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)

擬囊體側(cè)耳VWCE抗體Anti-MAP2K7 Antibody乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8(MFGE8)

德氏乳桿菌德氏亞種牛痘病相關(guān)激1抗體（絲/蘇蛋白激VRK1）Anti-MAP3K1 Antibody絲抑蛋白(Maspin)

血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體Rhizobacterdauci大鼠乳腺上皮細(xì)胞

頂端體相關(guān)蛋白7抗體Sphingomonaspolyaromaticivorans大鼠胰腺上皮細(xì)胞

14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174塞氏檸檬桿菌大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞

分泌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體Hyphomicrobiumzavarzinii大鼠胰島細(xì)胞
eIF4E與eIF4G的相互作用抑制劑(4E1RCat)谷氨酸棒桿 亞麻酸甲酯黑色Elisa

短桿狀馬賽 蘆薈多糖黑濃集Elisa

擬莖點(diǎn) 藏紅花酸二黃體生成Elisa

阿舒假囊酵母 大豆異黃酮混合功能氧化Elisa

釀酒酵母 奧美拉唑肌苷酸Elisa

球孢白僵 牛磺鵝脫氧膽酸鈉鹽肌酸激Elisa

香菇(林研6號(hào)) 磺舒敏感性脂肪Elisa

仁果叢梗孢 瑞鮑迪甙B甲狀腺Elisa

亮白曲霉 毛旋花子苷K堿性磷酸Elisa

膠孢 毛花苷C結(jié)合珠蛋白Elisa

枯草芽孢桿 D-熒光鹽金屬硫蛋白Elisa

枯草芽孢桿 α-酮戊二酸精氨酸加壓Elisa

腸膜明串珠葡聚糖亞種 甘油三酯精氨酸Elisa

假單胞 杠柳苷元亮氨酸氨肽Elisa

孢小克銀漢霉輪生變種 高紫檀磷酸果糖激Elisa