詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:吖啶橙染色液
英文名稱:
產品規格:100T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
橙(Acridine Orange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發波長為488nm,吸收波長為515nm。它與細胞中DNA和RNA結合量存在差別,復合物可發出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
番瀉葉(標準品)英文名稱: Lead (IV) acetateF-box蛋白家族FBXO18抗體包裝25g
翻白草(標準品)英文名稱: Lead powderFRG2B蛋白抗體包裝5g
反式茴香腦英文名稱: Lead(II) carbonate basicFAM71A蛋白抗體包裝25g
返魂草(麻葉千里光)(標準品)英文名稱: Leishman's stainFAM83F蛋白抗體包裝5g
芳樟(標準品)英文名稱: Leptomycin B 1% solutonFBXL17蛋白抗體包裝1g
防風(標準品)英文名稱: Lithium 3,5-diiodosalicylateFCHSD1蛋白抗體包裝1g
防己諾林堿(標準品)英文名稱: Lithium bromideFBXL5蛋白抗體包裝5g
防已(標準品)英文名稱: Lithium metaphosphateFBXL12蛋白抗體包裝1g
飛龍掌血根皮(標準品)英文名稱: Lithium oxalateFBXL3蛋白抗體包裝25g
飛揚草(標準品)英文名稱: Lithium stearateF-box蛋白相關蛋白11抗體包裝5g
非洲防己堿(標準品)英文名稱: Lithium sulfate monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體包裝100g
榧子(標準品)英文名稱: L-Threonic acid calcium salt成纖維生長因子受體底物2抗體包裝25g
粉萆薢(標準品)英文名稱: L-Tyrosine disodium salt hydrateFNBP1L蛋白抗體包裝5g
粉防己堿;漢防己(標準品)英文名稱: Luminol, sodium saltGATA結合蛋白2伴侶蛋白抗體包裝100g
楓香脂(標準品)英文名稱: Magenta-GalCD349抗體包裝25g
檸檬明串珠菌Leuconostoc│citreum 質量規格:HPLC>98%,標準品沙眼衣原體抗體試劑盒去氫駱駝蓬堿;Harmine?
季氏畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格:>98%,BR沙眼衣原體抗體試劑盒L-羥脯 ;L-Hydroxypro
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質量規格:含量測定,標準品沙漠猬因子試劑盒青蒿琥酯 ;Artesunate
吖啶橙染色液馬來西亞鏈霉 RITA (NSC 652287)Smad同源物8Elisa
糙皮側耳 WHI-P154Gremlin-1蛋白Elisa
華盛頓腥擲孢 Dalcetrapib水痘-帶狀皰疹病抗體Elisa
釀酒酵母 Entinostat (MS-275)腮腺炎病IgG抗體Elisa
皺褶青霉 ZM 336372乙酰抗體Elisa
硬結節桿 DAPT嘌呤霉敏感性氨肽Elisa
杜搟氏屬 Darunavir信號轉導分子1Elisa
枯草芽孢桿 Safinamide Mesylate信號轉導分子5Elisa
酒色紅菇 Deferasirox信號轉導分子8Elisa
淡紫擬青霉 Balaglitazone抗Ri抗體Elisa
變異鹽單胞 Atazanavir磷脂酰抗體Elisa
尖孢鐮孢 PQ 401線粒體肽蛋氨酸亞砜還原Elisa
黑木耳 LomeguatribL-谷氨酸Elisa
禾生殼二胞 Lenalidomide羥甲基戊二酸單酰Elisa
葡枝根霉 Pomalidomide胱天蛋白3Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)