c-Kit和c-Met抑制劑(DCC-2618)公司*的產(chǎn)品：Human plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 人血小板衍生生長因子葉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%
Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit 人血小板活化因子葉 用于和昆蟲培養(yǎng)，≥97%
Human Tissue-type Plasi

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：c-Kit和c-Met抑制劑(DCC-2618)

英文名稱：DCC-2618

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

淡紫擬青霉信號(hào)識(shí)別顆粒抗體Anti-FOXO1 Antibody信號(hào)6B(SEMA6B)

紫色倫茨氏菌SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體Anti-FOXM1 Antibody信號(hào)6A(SEMA6A)

米曲霉軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體Anti-FOXP1 Antibody信號(hào)5B(SEMA5B)

柄小鐮孢彈性蛋白抑制劑抗體Anti-FOXP1 Antibody信號(hào)5A(SEMA5A)

彩色豆馬勃4-1絲/蘇蛋白激39抗體Anti-FOXO3 Antibody(PB0192)信號(hào)4G(SEMA4G)

Diaporthe vaccinii Shear磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體Anti-FOXP3 Antibody信號(hào)4F(SEMA4F)

銅綠假單胞菌磷化突觸結(jié)合蛋白1抗體Anti-FOXP2 Antibody信號(hào)4D(SEMA4D)

煙曲霉磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體Anti-FOXP3 Antibody信號(hào)4C(SEMA4C)

日本根霉磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體Anti-FRMD6 Antibody信號(hào)4B(SEMA4B)

Sphingopyxis磷化突觸蛋白6抗體Anti-FOXP3 Antibody信號(hào)4A(SEMA4A)

大豆慢生根瘤菌磷化Src原癌基因抗體Anti-FPR2 Antibody信號(hào)3G(SEMA3G)

爪哇毛霉多配體聚糖4抗體Anti-FRZB Antibody信號(hào)3F(SEMA3F)

pCEP4（有突變點(diǎn)）絲蛋白14/膜型絲蛋白1抗體Anti-FRZB Antibody信號(hào)3E(SEMA3E)

鼠李糖乳桿菌絲/蘇蛋白激SIK1抗體Anti-FSCN1 Antibody信號(hào)3D(SEMA3D)

原小單孢菌合胞1抗體Anti-FSCN3 Antibody信號(hào)3B(SEMA3B)

中慢生華癸根瘤菌結(jié)腸癌抗原16抗體Anti-FSCN2 Antibody信號(hào)3A(SEMA3A)

絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移2抗體橢圓酵母Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD3抗體變色栓菌ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞

剪接體相關(guān)蛋白62抗體乳發(fā)酵短桿菌LoVo人結(jié)腸癌細(xì)胞

腫瘤抑制基因PEPE1抗體藤黃節(jié)桿菌Vero非洲綠猴腎細(xì)胞
c-Kit和c-Met抑制劑(DCC-2618)大腸埃希 1,3-苯二胰島樣生長因子結(jié)合蛋白-1Elisa

蜂房哈夫尼 -2-羧酸腦鈉;腦鈉尿肽Elisa

松針散斑殼 2-氨基-4-并噻唑前腦鈉Elisa

釀酒酵母 尸心肌肌鈣蛋白ⅠElisa

粟粒皮禿馬勃 酞菁藍(lán)B乙腦病Elisa

墳?zāi)构?jié)桿 三(三苯基膦)化銠(I)輪狀病抗體Elisa

茶藨子葡萄座腔 3-乙酰基噻吩促腎上腺Elisa

熱帶假絲酵母 2,3,5-基吡皮質(zhì)Elisa

凍土毛霉凍土變型 環(huán)基苯硫半胱氨酸雙加氧Elisa

寡養(yǎng)單胞 二(硅烷基)乙炔半胱次磺酸脫羧Elisa

天格爾黃桿 1-甲基環(huán)戊骨骼肌肌球蛋白重鏈4Elisa

*灰葡萄孢 2-氟-5-(三氟甲基)苯甲溶Elisa

新疆鹽地桿 1,3,5-三叔丁基苯半胱氨酸豐富分泌蛋白2Elisa

黑曲霉 雙(乙)化鈀(II)半胱氨酸豐富分泌蛋白3Elisa

迂回殼囊孢 5,10,5,20-四(3,5-二羥苯基) -21H,23H-卟吩性鼻炎抗體Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)