乙型肝炎病毒染色液(Shikata地衣紅法)公司*的產(chǎn)品：PFK2/PFKFB3 /FITC 熒光標(biāo)記6果糖激2抗體IgG鎢 99.99% metals basis
Phospho-PFK2 (Ser466) /FITC 熒光標(biāo)記化6果糖激2抗體IgG1,1,2-三烷 standard for GC, ≥99.8% (GC)
KLF2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠腸道內(nèi)富含的K

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：乙型肝炎病毒染色液(Shikata地衣紅法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

10-去乙酰巴卡丁III英文名稱： 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione腺苷環(huán)化激活肽-27/38抗體包裝1g

10-氧多烯紫杉英文名稱： 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedionep19ARF抑癌基因抗體包裝5g

13-O-（三乙基硅基）巴卡丁III英文名稱： 9-Bromophenanthrenep21蛋白抗體包裝100g

13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱： 3-BromophenanthreneP2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體包裝25g

13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱： 3,6-Dimethylphenanthrene神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體包裝1g

13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱： 3-Methylphenanthrene絲裂原活化蛋白激p38α抗體包裝5g

13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱： 3-Bromo-1,10-phenanthroline促尿鈉排泄肽前體C抗體包裝10mg

13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱： 5-Chloro-1,10-phenanthroline磷脂磷2C抗體包裝50mg

13-順式-酯視黃英文名稱： 2-Chloro-1,10-phenanthroline配對(duì)盒基因1抗體包裝5g

13-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α...英文名稱： 4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline配對(duì)盒基因2抗體包裝250mg

13-乙基-18,19-二去基-17α-pregn-...英文名稱： 5,6-Dimethyl-1,10-phenanthrolinep21激活激2抗體包裝1g

14-柔紅霉英文名稱： 2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline磷酯Cβ3抗體包裝5g

15-基前列異酯英文名稱： 2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝1g

15-基拉坦前列（游離）英文名稱： 2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝25g

15β-羥基醋環(huán)孕英文名稱： 3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline廣譜角蛋白PCK抗體包裝5g

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移6抗體試劑盒D-麥芽糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒D型Clostridium│perfringens Type D 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移2抗體試劑盒檸檬;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

海神弧菌Vibrio│neptunius 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移2抗體試劑盒L-亮;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
乙型肝炎病毒染色液(Shikata地衣紅法)聚紅粉端孢霉 6-噠3-羧酸乙酯Flag標(biāo)簽Elisa

紅色蠟?zāi)?/span> 甲基膦酸二甲酯腺病抗體Elisa

香港洛克氏 三溴鼠痘病抗體Elisa

白僵 N-甲基二環(huán)己基肺炎病抗體Elisa

長(zhǎng)蠕孢 磷酸氟達(dá)拉濱呼腸孤病III型抗體Elisa

 對(duì)溴苯酸甲酯脈絡(luò)叢腦膜炎病IgG抗體Elisa

Aquimonas 4-甲基吡唑流行性出血熱病抗體Elisa

Microbacterium marinilacus D-(+)-蘋果酸二乙酯過(guò)氧化物Elisa

變異鏈霉 5-氨基-1,2,4-噻二唑完整的成纖維生長(zhǎng)因子23Elisa

干草鞘氨單胞 5--2-苯甲成纖維生長(zhǎng)因子23的C端裂解片段Elisa

蠟狀芽孢桿 2-溴-5-苯甲去乙酰化Sirtuin-6Elisa

枯草芽胞桿 雙(3-氨基-4-羥苯基)砜球蛋白G2bElisa

產(chǎn)堿普羅威登斯 2-氨基-5-溴-3-芐氧基吡啶球蛋白G3Elisa

假單胞 7-氮雜-5-羧酸組織因子Elisa

鹽假單胞 2-(3-1H-吡唑基)吡啶抗抗體Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)